Validación de un método analítico para la detección de flumequina y ácido oxolínico en tejidos comestibles de pollos Broiler

Abstract

Las quinolonas y fluoroquinolonas corresponden a un grupo de drogas antibacterianas que han sido ampliamente utilizadas en medicina veterinaria. Particularmente, durante la última década, el uso de estos fármacos ha sido explosivo en producción animal, con el consecuente riesgo de generar residuos de estos fármacos en productos destinados a consumo humano. Con el objetivo de entregar a los consumidores un producto inocuo libre de residuos peligrosos para la salud, se han establecido límites máximos residuales (LMR) por parte de varios países como Japón y Chile y organizaciones internacionales, como la Food and Drug Administration (FDA) y la Unión Europea. El control necesario para que los productos de origen pecuario cumplan con los LMR se realiza dentro de Programas de Control de Residuos. Dichos programas deben contar con metodologías analíticas validadas. En este contexto, el objetivo de este trabajo fue validar un método analítico confirmatorio para la detección de residuos de ácido oxolínico y flumequina en músculo de pollos broiler, mediante el empleo de Cromatografía Líquida con Detector de Masa (LC-Ms/Ms) de acuerdo a las normativas de la Comunidad Europea y la de Estados Unidos de América, de manera que pueda ser utilizado en el Programa Nacional de Control de Residuos de Productos de Exportación. Para validar el método fue necesario fortificar muestras de músculo de pollos broiler libres de antimicrobianos con distintas concentraciones de ácido oxolínico y flumequina y analizarlas utilizando Cromatografía Líquida acoplado a un Detector Masa-Masa (LC-Ms/Ms). La sensibilidad del método determinó un límite de detección o CC de 0,72 µg/kg para ácido oxolínico y 0,53 µg/kg para flumequina. Se obtuvo un límite de cuantificación o CC de 1,21 µg/kg para ácido oxolínico y 1,54 µg/kg para flumequina. El coeficiente de correlación para los analitos fue mayor a 0,9 (R>0,9). De acuerdo a los resultados obtenidos, el método cumple con las condiciones de validación establecidas por la Decisión 2002/657/CE, en relación a los parámetros de linealidad, sensibilidad y repetitividad. En el caso de la recuperación, debido a que este parámetro arrojó valores no aceptados por la norma (Unión Europea, 2002), éste debe ser reevaluado previo al análisis de muestras para la detección de residuos de ácido oxolínico y flumequina en músculo de pollo en caso que éste sea utilizado en un Programa de Control de Residuos.

Quinolones and fluoroquinolones are a group of antibacterial drugs that has been widely used in veterinary medicine. During the last 10 years, these drugs have had an explosive use in food producing animals, wich may cause drug residues in products for human consumption. To assure the delivery of safe products to consumers, maximum residual limits (MRLs) have been established by countries such as Japan and Chile and different organizations, such as the Food and Drug Administration (FDA) and the European Union. Control Programs of Drug Residues are required in order that products from animal origin fulfill the MRLs. These programs must operate with adequately validated analytical methodologies. In this context, the objective of this work was to validate a confirmatory analytical method for the detection of oxolinic acid and flumequine in muscle of chickens, by means of the use of Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry (LC-Ms/Ms) according to the European Community and the United States of America requirements, so that it can be used in the National Control Program of Residues of animal products that will be exported to other countries. To validate the analitical method, free-drug muscle samples collected from broiler chickens analysis were needed. Samples were spiked with different concentrations of oxolinic acid and flumequine and analized using LC-Ms/Ms. The sensitivity of the method expressed as detection limit (CC) was 0.72 µg/kg for oxolinic acid and 0.53 µg/kg for flumequine. The detection capability (CCβ) was 1.21 µg/kg for oxolinic acid and 1.54 µg/kg for flumequine. The coefficient of correlation for the analytes was higher than 0.9 (R>0.9). According to these results, the method fulfills the conditions of validation established by Decision 2002/657/CE, in relation to parameters of linearity, sensitivity and repeatability. In the case of the recovery, this parameter threw unacceptable values compared with the established in european regulations (European Community, 2002), and must be again assessed previous to the analysis of samples for oxolinic acid and flumequine residues in a Control Programs of Residues.