Tesis Pregrado

Regeneración ósea y activación de osteoblastos en defectos óseos consecutivos a Periodontitis experimental en respuesta al tratamiento con vesículas extracelulares derivadas de linfocitos T reguladores

2026-05-08T14:45:39Z

Regeneración ósea y activación de osteoblastos en defectos óseos consecutivos a Periodontitis experimental en respuesta al tratamiento con vesículas extracelulares derivadas de linfocitos T reguladores Selman Cassis, Jazmín Samia Introducción: La periodontitis es una enfermedad crónica caracterizada por la destrucción progresiva e irreversible del hueso alveolar. Esta patología es impulsada por la respuesta inmune del hospedero, por un desequilibrio entre los linfocitos Th17, asociados a resorción ósea, y los linfocitos T reguladores (Tregs), asociados a regeneración ósea y a la diferenciación de osteoblastos. Existen estudios de terapias coadyuvantes para promover la recuperación del hueso alveolar, pero con resultados variables y poco reproducibles. Un estudio previo de nuestro grupo reportó que las vesículas extracelulares (EVs) son capaces de modular la respuesta inmune y la inflamación mediada por los linfocitos Th17 durante la periodontitis experimental, lo que se tradujo en una reducción de la resorción ósea alveolar. Sin embargo, el efecto directo de las vesículas extracelulares derivadas de Tregs (Treg-EVs) en la regeneración del hueso alveolar no ha sido demostrado. El objetivo de este estudio fue evaluar el impacto del tratamiento con Treg-EVs sobre la regeneración ósea y la activación de osteoblastos en defectos alveolares inducidos experimentalmente. Metodología: Se utilizó un estudio preclínico experimental en 24 ratones C57BL/6. La periodontitis experimental se indujo mediante una ligadura en los segundos molares durante 10 días. Los ratones con defectos óseos fueron asignados a grupos de periodontitis no tratados , periodontitis con vehículo (PBS) y periodontitis con tratamiento con Treg-EVs (10⁸ EVs en 5 μl de PBS) . El tratamiento consistió en dos inyecciones intragingivales. La formación de hueso alveolar se analizó mediante micro-CT para cuantificar el porcentaje de volumen óseo (%BV/TV) y la separación inter-trabecular (Tb. Sp). Adicionalmente, se empleó la técnica histoquímica con tinción de Hematoxilina y Eosina (H&E) y Fosfatasa Alcalina (ALP) para observar la estructura tisular e identificar osteoblastos activos (ALP+). Resultados: El tratamiento con Tregs-EVs produjo un incremento significativo en el %BV/TV respecto a los grupos con periodontitis no tratados y tratados con vehículo, acompañado de una reducción significativa de la Tb. Sp. El análisis histológico mostró activación de osteoblastos ALP+ en los animales tratados con EVs. 9 Conclusiones: El tratamiento con Tregs-Evs induce regeneración del hueso alveolar en defectos posteriores a periodontitis experimental y la activación de osteoblastos ALP+.

Optimización y estandarización de un modelo in vitro de estimulación de células epiteliales orales con Streptococcus gordonii y Streptococcus sanguinis para el estudio de respuestas proinflamatorias

2026-05-08T14:30:53Z

Optimización y estandarización de un modelo in vitro de estimulación de células epiteliales orales con Streptococcus gordonii y Streptococcus sanguinis para el estudio de respuestas proinflamatorias Lobos Díaz, Javiera Noemí Introducción: La periodontitis es una enfermedad inflamatoria crónica multifactorial asociada a biopelículas disbióticas que ocasionan la destrucción progresiva de los tejidos de soporte dental. Entre los colonizadores tempranos del microbioma oral destacan Streptococcus gordonii y Streptococcus sanguinis, los cuales contribuyen a la homeostasis oral, pero pueden comportarse como patobiontes en condiciones específicas. Estas especies son reconocidas por receptores tipo Toll (TLR) 2 y 4 en las células epiteliales, lo que induce la secreción de interleuquina-6 (IL-6), una citoquina clave en la progresión de la periodontitis. Se ha descrito que S. gordonii puede modular la producción de IL-6, mientras que S. sanguinis exhibe un efecto inmunomodulador más atenuado. En este estudio se evaluó el efecto de ambas especies sobre una línea celular epitelial oral humana (OKF6/TERT2), analizando la producción de IL-6 como marcador de respuesta proinflamatoria. Metodología: Se realizaron ensayos in vitro con células epiteliales humanas OKF6/TERT2 estimuladas con cepas de referencia de S. gordonii (ATCC 10558) y S. sanguinis (SK36). Las bacterias fueron cultivadas en medio BHI, inactivadas por calor/frío y aplicadas a una multiplicidad de infección (MOI = 100). Los sobrenadantes se recolectaron para cuantificar IL-6 mediante un ELISA comercial (Quantikine® Human IL-6), con lecturas a 450/562 nm. Los datos se analizaron en GraphPad Prism 10 y se informaron como media ± error estándar de la media (S.E.M). 9 Resultados: Las curvas de crecimiento de S. gordonii y S. sanguinis permitieron definir las fases exponenciales y estandarizar los inóculos bacterianos. El ELISA mostró concentraciones detectables de IL-6 en todas las condiciones, con un aumento basal en el control negativo, atribuible al uso de medio con suero fetal bovino. No se registraron incrementos significativos tras la estimulación, sugiriendo un comportamiento inmunomodulador de ambas especies. Conclusiones: El estudio estableció un modelo in vitro para evaluar respuestas proinflamatorias en células epiteliales orales frente a S. gordonii y S. sanguinis. Los resultados preliminares obtenidos sugieren que la secreción basal de IL-6, sin incrementos posteriores, sugiere una respuesta más reguladora que inflamatoria. Este modelo constituye una herramienta metodológica útil para futuras investigaciones que empleen medios libres de suero, bacterias viables o cocultivos con patobiontes periodontales.

Evaluación del efecto de N-lactoil-fenilalanina en la translocación de GLUT-4 e inflamación crónica en el músculo esquelético de un modelo murino con resistencia a la insulina inducida por obesidad

2026-05-08T14:20:35Z

Evaluación del efecto de N-lactoil-fenilalanina en la translocación de GLUT-4 e inflamación crónica en el músculo esquelético de un modelo murino con resistencia a la insulina inducida por obesidad Zavala Escalona, Valentina Ignacia La resistencia a la insulina inducida por obesidad provoca alteraciones profundas en el metabolismo del músculo esquelético, incluyendo una disminución en la translocación del transportador de glucosa tipo 4 (GLUT4) y la instauración de un estado de inflamación crónica de bajo grado. La N-lactoil-fenilalanina (Lac-Phe), un metabolito derivado del ejercicio, ha surgido como un regulador emergente del balance energético y de la homeostasis glucémica. No obstante, su acción directa sobre el músculo esquelético en condiciones de resistencia a la insulina permanece insuficientemente caracterizada. En este estudio analizamos los efectos de Lac-Phe sobre la captación de glucosa, la translocación de GLUT4 y la expresión de proteínas inflamatorias en un modelo murino de resistencia a la insulina inducida por dieta alta en grasas (HFD). Ratones C57BL/6 alimentados durante ocho semanas con dieta normal (NCD) o HFD fueron utilizados para el aislamiento de fibras del músculo flexor corto de los dedos (FDB). La captación de glucosa se evaluó mediante el análogo fluorescente 2-NBDG, mientras que la translocación de GLUT4 se determinó en animales electroporados con el constructo GLUT4-7myc-eGFP tras la exposición a Lac-Phe (3 μM; 24 h). Además, se cuantificó la expresión de la proteína inflamatoria NLRP3 mediante Western blot. Los animales HFD desarrollaron resistencia a la insulina, evidenciada por mayor peso corporal, incremento de adiposidad visceral y deterioro en la tolerancia a la glucosa. En fibras FDB, Lac-Phe aumentó significativamente la captación de glucosa en animales HFD de manera dependiente de concentración y tiempo, alcanzando niveles comparables a la respuesta insulínica del grupo NCD. La inhibición con indinavir demostró que este efecto depende predominantemente de GLUT4. En fibras electroporadas, Lac-Phe promueve la translocación de GLUT4 exclusivamente en el grupo HFD y, en paralelo, redujo la expresión de NLRP3, sugiriendo un efecto antiinflamatorio local. En conjunto, estos hallazgos indican que Lac-Phe potencia la captación de glucosa, favorece la translocación de GLUT4 y modula componentes inflamatorios en músculo esquelético insulinorresistente, 9 posicionándose como un modulador metabólico prometedor frente a la disfunción inducida por obesidad.

Medidas de resultados reportadas por los pacientes (PROMS) y su relación con las variables de éxito del tratamiento periodontal no quirúrgico

2026-05-07T15:59:45Z

Medidas de resultados reportadas por los pacientes (PROMS) y su relación con las variables de éxito del tratamiento periodontal no quirúrgico Rubio Cornejo, Alessandra Geraldine Introducción: Las enfermedades orales son un problema de salud pública por su alta prevalencia, su impacto en la calidad de vida y los costos asociados. La periodontitis, frecuente en adultos chilenos, es una enfermedad inflamatoria crónica que destruye el soporte dentario y se relaciona con diversas condiciones sistémicas. El éxito terapéutico suele evaluarse con indicadores clínicos como profundidad al sondaje, nivel de inserción clínica, índice de placa (IP) e índice de sangrado al sondaje (ISS); aunque, estos no reflejan la experiencia del paciente. En este contexto, los PROMs permiten valorar satisfacción, dolor y calidad de vida, aunque su uso en periodoncia chilena sigue siendo limitado, lo que resalta la necesidad de evidencia local. Objetivo: Evaluar la relación de las variables de éxito de tratamiento periodontal reportadas por los pacientes (satisfacción con tratamiento, percepción del dolor, calidad de vida y funcionalidad oral) con las variables de éxito de tratamiento periodontal no quirúrgico (IP y ISS). Metodología: La muestra incluyó 51 adultos (30 mujeres, 21 hombres) de 18 años o más con enfermedad periodontal atendidos en campos clínicos universitarios. Se registraron IP y ISS antes y después del tratamiento periodontal no quirúrgico. En la reevaluación (4–6 semanas), los pacientes completaron los PROMs (OHIP-14Sp, EVA de dolor y satisfacción usuaria). Para el análisis se aplicaron modelos de regresión lineal univariados ajustados por sexo. Resultados: El tratamiento periodontal no quirúrgico fue clínicamente efectivo, con reducción significativa del ISS (de 28.4% a 14.1%) y del IP (de 58.3% a 32.5%) (p < 0.05). Los pacientes reportaron una percepción favorable del tratamiento: 100% de satisfacción, bajo impacto en calidad de vida, dolor mayoritariamente leve y alta prevalencia de dentición funcional. No obstante, no se encontró asociación significativa entre PROMs e indicadores clínicos (ISS e IP), lo que evidencia una desconexión entre resultados biológicos y experiencia subjetiva. Conclusiones: Aunque el tratamiento periodontal no quirúrgico mostró una mejora clínica significativa, estas mejoras no se relacionaron con la percepción del paciente. Los hallazgos subrayan la necesidad de integrar un enfoque biopsicosocial que combine indicadores biológicos y PROMs para evaluar de manera integral el éxito terapéutico.