Comparación de métodos para el diágnostico de Mycobacterium bovis en Chile

Abstract

Con el objetivo de implementar métodos que disminuyan los tiempos de respuesta diagnóstica y por ende proporcionen rapidez en la emisión del resultado de tuberculosis bovina, se evaluaron y compararon los resultados obtenidos por los métodos BACTEC MGIT 960, cultivo bacteriológico en medio Stonebrink (ST), reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR), e Histopatología. Todo el trabajo se realizó en el Laboratorio de Micobacterias del Subdepartamento Laboratorios y Estación Cuarentenaria Pecuaria del Servicio Agrícola y Ganadero (SAG), siguiendo los protocolos establecidos por el laboratorio. Se utilizaron 100 muestras de tejido obtenidas de nódulos linfáticos y/u órganos con lesiones del tipo granulomatosas (LTG), provenientes de bovinos de plantas faenadoras o por inspección de seguimiento. Los resultados mostraron que el cultivo en el sistema BACTEC MGIT 960 puede disminuir el tiempo de detección de Mycobacterium bovis y favorecer la rapidez en la emisión del resultado en el diagnóstico de la Tuberculosis Bovina (TBB). En combinación las cuatro pruebas detectaron 89 muestras positivas y todas tuvieron concordancia positiva entre sí, que varió entre débil a moderada, según los índices de Kappa, con significancia estadística (p < 0,05). En cuanto a la eficiencia, cada método sobresalió por un parámetro diferente, siendo RT-PCR menos compleja y más rápida, los cultivos los más económicos comercialmente y de mayor certidumbre, aunque la Histopatología resultó con el mejor nivel de eficiencia combinado. Se propone implementar un esquema que incluya los cuatro métodos (histopatológico, molecular, un cultivo en medio sólido y un cultivo en medio líquido), que permita detectar el número máximo de resultados positivos, en el menor tiempo posible y con alta certidumbre.

In order to implement methods to shorten the time of growth and thus provide speed in issuing the results in the diagnosis of bovine tuberculosis were evaluated and compared the results obtained by the methods BACTEC MGIT 960, bacteriological culture amid Stonebrink (ST ), polymerase chain reaction in real time (RT-PCR), and histopathology. All work was performed in the Laboratory of mycobacteria at Subdepartment of Laboratories and Quarantine Station of the Agricultural and Livestock Service (SAG), following the protocols established by the Laboratory. 100 tissue samples obtained from bovine lymph nodes and / or organs with granulomatous lesions (LTG) were used. The results showed that cultivation in the MGIT 960 system can shorten the growth of Mycobacterium bovis and the time required for diagnosis of bovine tuberculosis. In combination, the four tests detected 89 positive samples and all had positive agreement among themselves, with significant (p<0,05) Kappa indexes which ranged from weak to middle values. Regarding efficiency, each method excelled some parameter, with RT-PCR being less complex and faster, bacteriological culture were the cheapest, although histopathology had the highest combined efficiency. These results support a diagnostic scheme that includes the four methods (histopathological, molecular, solid medium and a liquid medium) for achievement the maximum number of isolates, in the shortest time and with highest certainty.