Expresión de ARNs mensajeros de genes apoptóticos (Bax, Caspasa-9, Caspasa-3 y Bcl-2) en embriones tempranos de Seriola lalandi con diferente nivel de flotalidad

Abstract

La flotabilidad de los embriones tempranos de peces pelágicos se asocia a la calidad y sobrevivencia de éstos. En cautiverio se ha observado una alta mortalidad embrionaria que se ha relacionado con la pérdida de flotabilidad de los huevos, proponiéndose la participación de mecanismos apoptóticos. El objetivo de este estudio fue evaluar la expresión de genes relacionados con la apoptosis celular durante el desarrollo embrionario temprano de Seriola lalandi y su relación con el nivel de flotabilidad. Para esto, se evaluó mediante RT-qPCR la expresión relativa de Bax, Caspasa-9, Caspasa-3 y Bcl-2 en cinco estadíos del desarrollo previamente clasificados como embriones flotantes y no flotantes. Se observó una mayor expresión de Bax en embriones no flotantes, la cual aumentó significativamente hasta este estadío de gástrula. Caspasa-9 presentó niveles estables de expresión en las muestras flotantes hasta gástrula. En blástulas no flotantes se presentó la mayor expresión de este gen, la cual fue estadísticamente superior a la encontrada en blástulas flotantes. En blástulas y gástrulas, Caspasa-3 presentó mayor expresión en muestras no flotantes. La mayor expresión de los factores pro-apoptóticos Bax, Caspasa-9 y Caspasa-3 en algunos embriones no flotantes de S. lalandi, permitirían relacionar la pérdida de flotabilidad de estos embriones con la participación de mecanismos de apoptosis celular. Por otro lado, la expresión de ARNm que codifica para Bcl-2 no presentó diferencias entre embriones flotantes y no flotantes, lo que sugiere la participación de este factor anti-apoptótico como protector de la viabilidad celular del embrión a través del desarrollo.

The buoyancy of the early embryos in pelagic fish is associated with it is quality and survival. High mortality of early embryos in captivity conditions has been associated with the loss of buoyancy of the eggs, where apoptotic mechanisms have been proposed. Therefore, the aim of this study was to evaluate the expression of genes related to the apoptosis process during the early embryonic development of Seriola lalandi and its relationship with the buoyancy level of the embryos. For this, the relative expression of Bax, Caspase-9, Caspase-3 and Bcl- 2 was evaluated by RT-qPCR in five development stages, previously classified as floating and non-floating ones. High Bax expression levels was observed in non-floating embryos, which increased significantly until gastrula stage. Caspase-9 showed stable expression levels in floating samples up to gastrula. In non-floating samples, the highest expression of this gene was observed at blastula stage, which was higher than floating blastulae. At both blastula and gastrula stage, Caspasa-3 showed higher expression in non-floating samples. The higher expression of the pro-apoptotic factors Bax, Caspase-9 and Caspase-3 in some non-floating embryos of S. lalandi would allow us to relate the low buoyancy of these embryos with the participation of cellular apoptosis mechanisms. On the other hand, the expression of mRNA encoding Bcl-2 does not present differences between floating and nonfloating embryos, suggesting the participation of this anti-apoptotic factor as a protector of the cellular viability of the embryo through development