Detección, tratamiento y prevención de mollicutes en cultivos celulares

Abstract

La contaminación de cultivos celulares por Mollicutes es frecuente a nivel mundial y muy relevante ya que estas bacterias producen un amplio rango de alteraciones metabólicas y cromosómicas en las células afectadas que posiblemente alteran los resultados obtenidos, siendo su credibilidad discutible por el hecho de estar modificados y no ser representativos de la situación que se investiga. Considerando estos antecedentes, es necesario detectar periódicamente la presencia de estas bacterias en los cultivos celulares. Para ello se requiere estandarizar una técnica suficientemente sensible y específica que permita asegurar la presencia o ausencia de estos microrganismos. La hipótesis de este proyecto es que la contaminación por Mollicutes en cultivos celulares es detectable por PCR convencional y puede ser eliminada con luz UV en los medios de cultivo o tratamiento antibiótico en cultivos celulares, por lo que se implementó un PCR convencional para detectar si hay contaminación por Mollicutes en células en cultivo y se evaluó el uso de luz UV en medios de cultivo y distintos tratamientos antibióticos comerciales para erradicar la contaminación en los cultivos celulares. Esto permitió establecer un protocolo adecuado de determinación y descontaminación de Mollicutes en cultivos celulares.