Estudio y evaluación de la comunicación celular mediada por vesiculas extracelulares de adipocitos (ADEVS) en células renales humanas

Abstract

La obesidad es una enfermedad de carácter mundial que afecta a un gran porcentaje de la población mundial. Esta se caracteriza por el aumento del tamaño del tejido adiposo, lo que genera un estado de inflamación crónica de baja intensidad, que aumenta la liberación de adipocinas que pueden alterar el funcionamiento de otros tejidos y órganos, generando diversas patologías, como diabetes, enfermedades cardiovasculares, etc. Además, el tejido adiposo es capaz de liberar vesículas extracelulares (adEVs), las cuales también pueden ejercer un rol regulatorio a distancia. Por ello, en este trabajo, se propone que estas adEVs pudiesen contener factores que generen un efecto negativo en diversos órganos, como, por ejemplo, el riñón y así, provocar un estado de patología crónica. Así, se realiza un modelo de trabajo in vitro donde se estudie el efecto de las adEVs sobre células renales, buscando simular lo que ocurriría en un organismo y, evaluar si se genera un efecto mediante la medición de la expresión génica de marcadores de inflamación y fibrosis renal. Para ello, se caracterizó de manera efectiva el proceso de adipogénesis in vitro de la línea celular de preadipocitos SW872 mediante cambios morfológicos y de expresión génica y proteica. Luego, mediante ultracentrifugación, se aisló las adEVs desde el medio de cultivo de adipocitos, las que se caracterizaron por su tamaño, morfología y cargo proteico. Las adEVs se administraron a cultivos de células renales humana HCD por 24 horas. Se evaluó la expresión génica de un grupo de marcadores de inflamación y fibrosis, en presencia de adEVs, las que afectaron la expresión de IL-6, NGAL, COL1A1 y CTGF, y aumentaron en forma significativa la expresión de IL-1B. Por último, se estudió la internalización de las adEVs en las células renales in vitro mediante microscopía de fluorescencia, donde se observó la efectiva captación de estas estructuras por parte de la célula renal. En base a estos antecedentes, este estudio revela que las adEVs de la línea SW872 pueden ser aisladas y concentradas in vitro de manera efectiva mediante cultivos en escala de laboratorio. Además, las adEVs pueden interactuar con células de la línea celular renal HCD in vitro, siendo capaces de modificar su fenotipo. Este resultado es pionero y contribuye un aporte a la comprensión de la fisiopatología de la obesidad y su impacto en otros tejidos.