Efecto quimiosensibilizante de metformina sobre esferas derivadas de células de carcinoma mamario canino CF41.Mg

Abstract

El cáncer mamario canino es la neoplasia más frecuente en la hembra reproductivamente intacta. Se ha descrito que dentro de la masa tumoral mamaria hay una subpoblación celular llamada células neoplásicas troncales o iniciadoras de tumores (CNT), las que tienen capacidad de autorenovación, de diferenciación, además de exhibir resistencia a quimio y radioterapia. Las CNT in vitro pueden formar agrupaciones esferoidales, estructuras celulares que muestran alta tumorigenicidad y resistencia a fármacos antitumorales. El mecanismo de resistencia más frecuente se relaciona con la sobreexpresión y/o aumento de la actividad de transportadores proteicos de la familia “ATP binding cassetes (ABC)”, como la glicoproteína P. Metformina es un fármaco utilizado en el tratamiento de diabetes tipo 2 en humanos, y ha mostrado efectos antitumorales tanto in vitro como in vivo. Existe evidencia que esta droga podría inducir un efecto quimiosensibilizante sobre células tumorales mamarias humanas, no existiendo reportes en células neoplásicas animales. En este estudio se evaluó el efecto de metformina sobre la viabilidad en esferas derivadas de células de carcinoma mamario canino CF41.Mg expuestas a doxorrubicina, así como la actividad y expresión de glicoproteína P en respuesta a esta droga. Metformina 5 mM asociado a 500 ng/ml de doxorrubicina disminuyeron significativamente (p<0,05) el número de células vivas derivadas de esferas, comparado con cada fármaco por separado. Sin embargo, la actividad de glicoproteína P no fue alterada por 5 mM metformina. Estos resultados sugieren que metformina ejerce un efecto citostático y aditivo con doxorrubicina sobre esferas derivadas de células de carcinoma mamario canino CF41.Mg, y que este efecto no se relacionaría con una modulación negativa de glicoproteína P inducida por este fármaco

Canine mammary cancer is the most frequent neoplasm in the reproductively intact female. Within the mammary tumors there is a cellular subpopulation called cancer-stem cells or tumor-initiating cells (CNT), which have a capacity for self-renewal, differentiation, and resistance to chemo and radiotherapy. CNT`s can form spheres in vitro, which are cellular structures that have high tumorigenicity and resistance to antitumor drugs. The most frequent resistance mechanism is related to overexpression and increased activity of protein transporters called "ATP binding cassettes (ABC)", such as P- glycoprotein. Metformin is a drug used in the treatment of type 2 diabetes in humans and has shown antitumor effects both in vitro and in vivo. There is evidence that this drug could induce a chemosensitizing effect on human mammary tumor cells, with no reports on animal tumor cells. In this study, the effect of metformin on viability in spheres derived from CF41.Mg canine mammary carcinoma cells exposed to doxorubicin was evaluated, as well as the activity and expression of P-glycoprotein in response to metformin. 5 mM metformin associated with 500 ng/ml doxorubicin significantly decreased (p <0.05) the number of live cells derived from spheres, compared with each drug separately. Nevertheless, P-glycoprotein activity was not altered by 5 mM metformin. These results suggest that doxorubicin-associated metformin exerts a cytostatic effect on spheres derived from CF41.Mg cells, and that effect is not related to down-regulation of P glycoprotein induced by this drug