Inmuno localización de NLRP3, TXNIP, IL-1β y GSDMD de los músculos esqueléticos rápidos, lentos y mixtos en roedores insulino resistentes

Abstract

INTRODUCCION. Estudios recientes han sugerido un papel central del complejo proteico NLRP3 en el desarrollo de la inflamación relacionada a la obesidad, caracterizado como un nexo metabólico entre metabolismo e inflamación. Se ha descrito que esta inflamación se asocia directamente a la activación de Interleuquina (IL)-1β por parte del inflamasoma NLRP3, la cual es liberada desde la célula a través de poros conformados por la proteína Gasdermina D (GSDMD). A su vez, la

actividad del inflamasoma NLRP3 se ve modulada por la proteína TXNIP (del inglés, Thioredoxin- interacting protein) que ha sido sugerida ser regulada por especies reactivas del oxígeno, éstas

últimas, descritas ampliamente durante estadios de resistencia a la insulina y diabetes de tipo 2. La regulación del inflamasoma NLRP3 ha sido caracterizada en diferentes células; sin embargo, escasamente explorada en el musculo esquelético y como su localización se asocia con las características fenotípicas y metabólicas de diferentes músculos (rápidos, lentos y mixtos) durante resistencia a la insulina. OBJETIVO. Por lo tanto, el objetivo fue evaluar la inmunolocalización de NLRP3, además de IL-1β, TXNIP y GSDMD en músculos rápidos, lentos y mixtos aislados desde ratones insulino resistentes y controles. METODOLOGIA. Los músculos FDB, gastrocnemio, soleo y masetero fueron obtenidos desde ratones C57BL/6J luego de 8 semanas de dieta control (NCD) y alta en grasas (HFD). Se realizó inmunofluorescencia para las proteínas NLRP3, GSDMD, TXNIP e IL-1β en cortes transversales de músculos y fueron visualizadas por microscopia de EPI fluorescencia. Para evaluar el tipaje de fibras, se llevó a cabo inmunofluorescencia contra la cadena pesada de miosina tipo I (BAD5) y tipo II (SC71). Los parámetros bioquímicos y morfométricos de

los animales fueron medidos con técnicas convencionales. RESULTADOS. NLRP3, GSDMD e IL- 1β presentan una mayor distribución en músculos rápidos y lentos de ratones con HFD. Sin

embargo, en relación con TXNIP no se obtuvieron resultados concluyentes respecto a su distribución. Una mayor distribución de NLRP3 fue observada en fibras tipo II. CONCLUSION Y PERSPECTIVAS. Todas las proteínas estudiadas se encuentran presentes en los músculos rápidos, lentos y mixtos. NLRP3 colocaliza con TXNIP y se encuentra principalmente en fibras tipo II. Futuros estudios son necesarios para describir con mayor profundidad la expresión, distribución y actividad del complejo inflamasoma NLRP3 y de las proteínas que modulan su activación junto con la liberación de IL-1β. La evidencia presentada podría ayudarnos a definir si la localización del complejo inflamasoma NLRP3 es relevante para la comprensión de la resistencia a la insulina muscular y su impacto como potencial blanco en alteraciones metabólicas.