Actividad antioxidante de extractos estandarizados de hojas de matico y llantén y su efecto sobre la capacidad antioxidante plasmática y los niveles basales de MDA plasmáticos en ratas tratadas oralmente con estos extractos

Abstract

La importancia mundial que hoy tienen las plantas medicinales ha fomentado el desarrollo de fitofármacos por las compañías farmacéuticas. A diferencia de los fármacos sintéticos, las etapas para el desarrollo de fitofármacos (formulaciones que contienen extractos de hierbas polivalentes), no están claramente definidos, estandarizados y normalizados. Estas preparaciones a base de hierbas son muy diversas y los estudios farmacocinéticos y farmacodinámicos de ellos son escasos. De ahí la importancia de la normalización de los procesos que intervienen en la obtención de extractos herbales y fitofármacos, así como la determinación de la dosis, la seguridad y la eficacia de fitofármacos. El estudio de los parámetros farmacocinéticos requiere datos experimentales, que se resumen en las curvas de dosis-respuesta. En estas curvas se representa la concentración plasmática del fármaco en función del tiempo después de su administración. La concentración individual de principios activos en los extractos de hierbas es muy baja, por lo que es difícil su cuantificación plasmática utilizando los métodos de HPLC clásicos. Asimismo, se ha observado que existe una correlación directa entre la concentración plasmática de los principios activos presentes en un fármaco con los efectos farmacológicos observados. Si se acepta esta correlación, la cuantificación del principio activo podría ser reemplazada por cualquier efecto medible en plasma. Las hojas de las plantas en general, poseen un alto contenido de antioxidantes, siendo mayoritarios los compuestos polifenólicos. Existen diversas publicaciones que indican que estos compuestos ejercen diferentes efectos farmacológicos relacionados con su actividad antioxidante. Así, preparados de ellos se han asociado a la terapia clásica de patologías tales como enfermedades cardiovasculares y neurodegenerativas (16, 62, 64). Considerando los antecedentes expuestos, en este trabajo se utilizaron extractos hidro-alcohólicos de hojas de Buddleja globosa Hope (matico) y Plantago major L. (Llantén). Extractos hidro-alcohólicos de matico y llantén, previamente caracterizados por su actividad antioxidante in vitro, fueron administrados oralmente a ratas Sprague-Dawley. El análisis de la capacidad antioxidante plasmática a través del tiempo, mostró un aumento de la capacidad de reducir hierro y una disminución de la concentración plasmática de malondialdehído, producto de la oxidación de los lípidos celulares. Por otra parte, el análisis cromatográfico (HPLC) del plasma de las ratas, no mostró los picos correspondientes a los marcadores polifenólicos seleccionados para cada planta (estándares de polifenoles). Como una forma de detectar la presencia de los marcadores seleccionados en los extractos, muestras de los extractos fueron analizadas por LC-masa. Los cromatogramas obtenidos por este método mostraron la presencia en los extractos de los marcadores seleccionados; por lo tanto, la no aparición de ellos en los cromatogramas HPLC confirma la falta de sensibilidad del método HPLC implementado para cuantificar tan pequeñas cantidades de principios activos. El aumento de la capacidad antioxidante plasmática sin embargo, demuestra que hubo absorción de los antioxidantes presentes en las dosis orales de los extractos herbales administrados a las ratas. Estos resultados nos permiten postular que para determinar los parámetros farmacocinéticos de fitofármacos, la determinación del efecto farmacológico, en este caso el efecto antioxidante, podría reemplazar a la concentración plasmática. Cabe destacar que este trabajo representa el primer intento para determinar parámetros farmacocinéticos de fitofármacos, preparados herbales polivalentes. Sin embargo, se necesitan nuevos experimentos que permitan estandarizar las condiciones experimentales implementadas de tal forma que esta metodología pueda que esta metodología pueda ser utilizada en el estudio farmacocinético de fitofármacos

The global importance now given to medicinal plants has encouraged the development of phytodrugs by pharmaceutical companies. Different to synthetic drugs, the stages for the development of phytodrugs (formulations containing polyvalent herbal extracts), are not clearly defined, standarized and normalized. These herbal preparations are very diverse and the pharmacokinetics and pharmadynamics studies of them are scarce. Hence the importance of standardizing the processes involved in obtaining herbal extracts and phytodrugs, as well as, the, the dosage, safety and efficacy of phytodrugs. The study of pharmacokinetic parameters requires experimental data, which are summarized in dose-response curves. These curves plot the plasmatic drug concentration versus time after administration. The individual concentration of active ingredients in herbal extracts are very low, so their plasmatic quantification is difficult using the classis HPLC methods. It has been observed that there is a direct correlation between plasma concentrations of the active ingredients present in a drug with the pharmacological effects observed. If this correlation is accepted, the quantification of the active ingredient could be replaced by any measurable effect on plasma. In general, the leaves of plants have a high content of antioxidants, being polyphenolic compounds the major constituents. There are different publications indicating that these compounds have many pharmacological effects related to its antioxidant activity. This is the reason why the use of herbal preparations has been associated with conventional theraphy of diseases such as cardiovascular and neurodegenerative (16, 62, 64). Considering the above, this study used hydro-alcoholic extracts of leaves of Buddleja globosa Hope (matico) and Plantago major L. (Llantén). Hydro-alcoholic extracts of matico and llantén, previously characterized for their in vitro antioxidant activity, were orally administered to Sprague-Dawley rats. Analysis of plasma antioxidant capacity over time showed an increase in the ability to reduce iron and a decreased in the concentration of plasmatic malondialdehyde, product of celular lipid oxidation. Moreover, chromatographic analysis (HPLC) of rat’s plasma showed no peak corresponding to the polyphenolic markers selected for each plant (polyphenols standards). As a way to detect the presence of polyphenols markers, extract samples were analyzed by LC-mass chromatography. The chromatograms Obtained by this method showed the presence of the selected markers in the extracts; therefore, the non-appearance of them in the HPLC chromatograms confirms the lack of sensitivity of the HPLC method implemented to quantify such small amounts of active principles. The increase in plasma antioxidant capacity however, shows absorption of antioxidant compounds present in the oral doses of herbal extracts given to rats. These results allow us to postulate that to determine the pharmacokinetic parameters of phytodrugs, determination of pharmacological effect, in this case antioxidante effect, could replace the determination of plasmatic concentration levels. It is worthy to note that this work represents the first attempt to determine pharmacokinetic parameters of phytodrugs (polyvalent herbal preparations). However, further experiments to standardize experimental conditions implemented so that this methodology can be used in pharmacokinetic studies of phytodrugs, are needed