Papel de factor inhibidor de leucemia (LIF) en la neurogénesis del epitelio olfatorio de rata adulta

Abstract

En el epitelio olfatorio, las neuronas olfatorias se regeneran durante toda la vida. El Factor Inhibidor de la Leucemia (LIF) es una citoquina que actúa como agente mitogénico de los precursores neuronales. Resultados obtenidos en nuestro laboratorio demostraron que el óxido nítrico (NO), un segundo mensajero gaseoso producido por la enzima óxido nítrico sintasa (NOS), induce la proliferación de los precursores neuronales. Lo anterior sugiere que el NO podría actuar como un segundo mensajero del LIF, mediante un aumento de la expresión de la isoforma inducible de la NOS (INOS). El objetivo de este trabajo fue determinar si los precursores neuronales del epitelio olfatorio expresan el receptor de LIF (LIF-R) y si LIF induce la expresión de iNOS. Para esto se utilizaron cultivos primarios de precursores neuronales del epitelio olfatorio de rata que fueron tratados con LIF (20ng/mL) por 24 horas. Se determinó la expresión de LIF-R e iNOS mediante RT-PCR e inmunofluorescencia indirecta. Los resultados obtenidos indican que la expresión de LIF-R e iNOS aumentó en 45,28 y 95,48% respectivamente, en relación a los tratamientos controles (medio mínimo sin factores de crecimiento y medio con EGF). Estos resultados fueron corroborados por inmunofluorescencia. Lo anterior confirma que los precursores neuronales expresan LIF-R y que el LIF induce la expresión de iNOS, sugiriendo que el óxido nítrico mediaría el efecto de LIF sobre la proliferación de los precursores neuronales en la neurogénesis del epitelio olfatorio.

In the olfactory Epithelium, the olfactory neurons regenerate during the entire lifetime. The Leukemia Inhibitor Factor (LIF) is a cytokine that promotes the proliferation of the neuronal precursors. Previous results obtained in our laboratory demonstrated that nitric oxide (NO), a second messenger produced by the enzyme nitric oxide synthase (NOS), induce proliferation of the neuronal precursors. This suggests that the NO could act as a second messenger of LIF. That leads to the expression of the inducible NOS isoform (iNOS). The aim of this work was to determine whether neuronal precursors express LIF receptor (LIF-R) and whether LIF treatment induces the expression of iNOS. Using primary cultures of olfactory neuronal precursors treated with LIF (20 ng/µL) for 24 hours, the LIFR and iNOS expression was determined by RT-PCR and indirect inmunofluorescence. The LIF-R and iNOS expression increased in 45.28 and 95.48% respectively, respect to the control treatments (DMEN-F12 and EGF). Results that were corroborated by inmunofluorescence. These results confirm that neural precursors express LIF-R and that LIF induces the expression of iNOS, suggesting that nitric oxide would mediate the LIF effect over neuronal precursor cells proliferation during the neurogenesis of the olfactory epithelium.