Uso de vectores virales adeno-asociados para estudiar el efecto de la ganancia de función del factor de transcripción XBP1 en un nuevo modelo murino para la enfermedad de huntington

Abstract

La enfermedad de Huntington es una enfermedad neurodegenerativa hereditaria causada por la expansión del codón GAC en el primer exón del gen que codifica para la proteína Huntingtina. Esta mutación se traduce en una expansión de una región rica en glutamina en el extremo amino-terminal de la proteína y le confiere una ganancia de función dañina para el organismo, en especial al sistema nervioso. La proteína mutante forma agregados toxicos, llevando a una perdida neuronal selectiva en el estriado lo que desencadena los síntomas asociados a la patología. Hasta el momento no ha sido posible desarrollar una cura o terapia contra esta patología. Estudios recientes sugieren la posible participación de respuestas a estrés de retículo en la enfermedad de Huntington. En este trabajo se reporta la generación de un nuevo modelo para estudiar la enfermedad de Huntington in vivo Este modelo animal fue generado mediante la trasferencia genica a través de vectores virales adeno-asociados, codificantes para un fragmento anino-terminal de 588 aminoácidos de Huntingtina humana con una región patológica de 95 glutaminas, fusionado a la proteína fluorescente roja monomerica. Para esto, la secuencia codificante para la proteína de fusion Htt588Q95-mRFP fue clonada en un vector de expresion viral adeno-asociado con el cual luego se produjeron las partículas virales recombinantes. Las partículas virales fueron inyectadas intraestriatalmente en ratones macho adultos mediante estereotaxis y se evaluo la agregacion de la proteína Huntingtina mutante al cabo de 2, 4 y 8 semanas. Luego de 2 semanas post-inyeccion fue posible observar células con inclusiones citoplasmáticas, alcanzando un 70% de agregación máxima al cabo de 4 semanas post-inyecci6n. Con el objetivo de analizar el impacto del estrés de retículo en la patología, se coinyectaron los virus adeno-asociados codificantes para la proteina de fusion Huntingtina mutante y para el factor de trascripcion X-box Binding Protein activo en la region de estriado. La sobreexpresion del factor de transcripcion XBP1 llevo a una disminucion en un 15,1% en la agregacion de Huntingtina mutante evaluada 4 semanas post-inyeccion. Estos resultados indican que la sobreexpresion del factor de trascripcion activo, XBpls, representa una potencial alterativa terapeutica en el tratamiento de las características patologicas de la enfermedad de Huntington en un nuevo modelo in vivo