| Abstract | dc.description.abstract | Una de las vías de administración de fármacos más frecuentemente utilizadas es la oral, ya que, al no ser invasiva, es uno de los factores que favorece la adherencia por parte del paciente al tratamiento. Sin embargo, muchas veces se alcanza una baja biodisponibilidad por vía oral, debido a una absorción limitada del fármaco, lo que se traduce en una eficacia disminuida, pudiendo limitar los potenciales nuevos usos clínicos de diversas moléculas. Entre los factores que determinan la absorción de un fármaco administrado por la vía oral se encuentran la hidrosolubilidad y permeabilidad, siendo también un factor importante el tiempo de residencia en el tracto gastrointestinal. Además, existen fármacos que son sustrato de bombas de eflujo, tales como la glicoproteína P (Pgp), lo que reduce la absorción de diversos fármacos lipofílicos.
Por otra parte, Eudragit ® RS (ERS), un derivado de ésteres de polimetacrilato, es un polímero hidrofóbico y soluble en disolventes orgánicos miscibles en agua, tales como acetona. Este polímero se usa en la industria farmacéutica principalmente como recubrimiento de tabletas de liberación prolongada, además de ser utilizado ampliamente en sistemas para la entrega de fármacos, donde ha mostrado tener propiedades mucoadhesivas y ser capaz de generar nanosuspensiones en agua. Otro polímero interesante es poloxámero 188, un copolímero hidrofílico compuesto por polióxido de etileno y polióxido de propileno en bloque. Este es ampliamente utilizado como excipiente en distintas formulaciones farmacéuticas, debido a sus propiedades como surfactante, emulsionante, solubilizante y dispersante. Además, se ha descrito que poloxámero 188 tiene actividad inhibitoria sobre Pgp, por lo que podría favorecer la absorción de fármacos.
Teniendo en cuenta lo presentado anteriormente, en esta tesis se desarrollaron nanovehículos de ERS cubiertos de P188, para favorecer la dispersión de loperamida en medios acuosos e inhibir su eflujo mediado por Pgp. Loperamida (un fármaco clase II, agonista de los receptores mu-opiode), fue seleccionado como fármaco modelo al ser altamente lipofílico y sustrato de Pgp, por lo que es actualmente usado sólo como antidiarreico, pese a poseer un alto potencial de nuevas aplicaciones terapéuticas. Para optimizar el proceso de síntesis de los nanovehículos, se evaluaron las variables que afectan los parámetros fisicoquímicos, y se realizaron ensayos in vitro para evaluar la capacidad del poloxámero 188 de inhibir Pgp. Esto último fue evaluado en dos condiciones: poloxámero 188 en solución, e incorporado en el nanovehículo.
Los nanovehículos fueron sintetizados mediante nanoprecipitación, y mostraron un tamaño de 142,6 ±11,3 nm y un potencial Z igual a 38,4 ±2,90. Tras ajustar la fase acuosa a un pH básico se alcanzó un 93,0% ±1,1 de eficiencia de encapsulación de loperamida, logrando dispersar altas cantidades de loperamida en un medio acuoso. La eficiencia de encapsulación además fue analizada mediante un modelamiento bicompartimental asociado a la técnica de diafiltración, lo que mostró un 62% unido de manera irreversible, mientras que un 38% se encontró reversiblemente unido. Por otra parte, el perfil de liberación arrojó tras las 6 horas de experimento, que solo un 32,8% ± 0,9 del total encapsulado fue liberado desde los nanovehículos. La liberación desde los nanovehículos también fue analizada mediante modelamiento matemático, lo que mostró el ajuste a una liberación bifásica, donde un 11,3% sería liberado de manera explosiva al inicio, mientras que el 21,7% restante tendría un comportamiento de liberación retardada.
Para evaluar la permeabilidad de loperamida se realizaron experimentos de incorporación de loperamida en una monocapa de células MDCK-MDR1 (que expresan Pgp humana). Estos resultados mostraron que los nanovehículos aumentan la incorporación celular de loperamida en alrededor de un 110% respecto a loperamida en solución y en aproximadamente un 20% respecto loperamida más verapamilo, un conocido inhibidor de Pgp. Estos resultados sugieren que la concentración de loperamida dentro de la célula es sensible a la inhibición de Pgp.
Con la finalidad de determinar si los nanovehiculos interfieren en el sistema de transporte de fármacos, en células MDCK-MDR1 cultivadas a confluencia, se desarrollaron ensayos de transporte agregando los nanovehiculos sobre el lado apical o basolateral. No se observó un efecto sobre las razones de eflujo de loperamida cuando se utilizó verapamilo, pero sí de loperamida encapsulada en nanovehículos y en la mezcla física de loperamida con nanovehículos control. Además, los nanovehículos mostraron ser capaces de hacer más eficiente la rapidez con que loperamida atraviesa la monocapa celular. De este modo, estos resultados sugieren que la principal limitante para obtener un mayor transporte apical/basolateral (A/B) neto sería la baja solubilidad acuosa de loperamida, y no el hecho de ser sustrato de Pgp.
Finalmente, en esta tesis se obtuvieron nanovehículos poliméricos en los que se logró aumentar la cantidad de loperamida dispersada en medios acuosos a pH neutro en alrededor de 400 veces más, mientras que las razones de eflujo disminuyeron aproximadamente 10 veces. Por lo tanto, estos nanovehículos permitirían favorecer la absorción gastrointestinal de loperamida, al aumentar la dispersión de esta en medios acuosos y favorecer su transporte A/B
La caracterización mecanística realizada en esta tesis facilitará próximas investigaciones asociadas al desarrollo de nuevos nanovehículos. Además, el prototipo de nanoformulación farmacéutica desarrollado permitiría en un futuro replantear los usos terapéuticos de loperamida. | es_ES |
