Evaluación de la actividad de la metaloproteinasa-2 y detección del inhibidor tisular TIMP-1 en líquido sinovial de la articulación metacarpofalángica equina macroscópicamente normal con diferentes recuentos celulares

Abstract

La osteoartritis (OA) es la enfermedad articular de mayor frecuencia de presentación en los equinos. Independiente de la causa de origen, uno de sus componentes más importantes es el cuadro inflamatorio, que puede comprometer al cartílago, membrana sinovial, cápsula articular o hueso subcondral. Esto genera la liberación de mediadores inflamatorios alterándose el metabolismo articular e inhibiéndose la síntesis de los componentes de la matriz extracelular (MEC) del cartílago y de la membrana sinovial. Este desbalance en el recambio de la matriz, provocado por la pérdida de regulación de la síntesis y de la actividad de las metaloproteinasas y de sus inhibidores, provoca la pérdida gradual de componentes de la MEC del cartílago, lo que conduce finalmente al desarrollo de la OA. En esta memoria de título se estudió la actividad de la metaloproteinasa-2 (MMP-2) y la presencia del inhibidor tisular de metaloproteinasa-1 (TIMP-1), con el fin de establecer las posibles relaciones con los indicios prematuros de daño o alteración articular. Para este estudio se utilizaron 20 articulaciones metacarpofalángicas de equinos mestizos, beneficiados en el matadero “La Pintana”. Se obtuvo líquido sinovial mediante artrocéntesis aséptica en el cual se midió el recuento total de células nucleadas (RCN) y la cantidad de proteínas totales con el fin de seleccionar muestras que tuvieran rangos fisiológicos o levemente aumentados. Se formaron dos grupos: A (n=10) articulaciones macroscópicamente normales con RCN < 1000 por μL y B (n=10) articulaciones macroscópicamente normales con RCN > 1000 por μL. Se realizó una artrotomía y se extrajo muestras de cartílago articular para análisis histológico en cada muestra. El grupo B presentó un aumento estadísticamente significativo en la cantidad de grupos isógenos. Este resultado permitió establecer que existe un inicio de OA temprana. En ambos grupos se detectó la pro-MMP-2 no existiendo diferencias en su cantidad. La presencia del TIMP-1 no se pudo evidenciar a través de la técnica de “Western Blot”, debido a la interferencia que presentaba el segundo anticuerpo y no pudo ser repetida por la ausencia de anticuerpos específicos TIMP-1 para la especie equina y los altos costos del mismo

Osteoarthritis (OA) is the most common joint disease in horses. Regardless of the root cause, one of its most important components is an inflammatory condition, either in cartilage, synovial membrane, articular capsule or subchondral bone. This generates the release of inflammatory mediators and articular metabolism altering inhibited the synthesis of extracellular matrix components of cartilage and synovium. This imbalance in matrix turnover, caused by the loss of regulation of the synthesis and activity of metalloproteinases and their inhibitors, causes gradual loss of components of the extracellular matrix (ECM) of the cartilage, which ultimately leads to the development of OA. Memory title was studied the activity of metalloproteinase-2 (MMP -2) and the presence of tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP -1) was studied in order to establish possible relations with premature signs of damage or alteration articular. For this study, were used 20 metacarpophalangeal joints of crossbred equines, benefited in the slaughterhouse "La Pintana". Synovial fluid was obtained by aseptic needle aspiration in which the total nucleated cell count (NCC) and total protein amount in order to select samples that have physiological or slightly increased was measured ranges. Two groups were formed: A (n = 10) macroscopically normal joints with NCC < 1000 μL and B (n = 10) macroscopically normal joints with NCC > 1000 μL. Was performed joint arthrotomy and articular cartilage samples extracted for histological analysis, group B had a higher amount of isogenic groups being statistically significant difference for counting the isogenic groups. This result established that there is an early onset of OA. In both groups, the pro-MMP-2 was detected no differences in quantity. The presence of TIMP-1 could not be evidenced through the technique of Western blotting, due to the interference presented by the second antibody and could not be repeated by the absence of antibodies TIMP-1 for equine species and high costs thereof