Identificación de mutaciones en el gen RHD en pacientes chilenos con el fenotipo D débil o parcial

Abstract

Los grupos sanguíneos se clasifican de acuerdo a los antígenos presentes en los glóbulos rojos. En el sistema de clasificación Rh no siempre es posible determinar inequívocamente el grupo sanguíneo, en cuyo caso los pacientes son clasificados como D débiles o parciales. El antígeno D es codificado por el gen RHD, y su análisis puede ser utilizado como una herramienta complementaria a los métodos serológicos convencionales. En el presente trabajo se secuenciaron los exones y las secuencias aledañas del gen RHD en 35 pacientes previamente clasificados mediante pruebas inmunológicas como D débiles o parciales. Se identificó una mutación relacionada al fenotipo débil o parcial en 31 de los 35 pacientes (88,57%), mientras que en 4 pacientes sólo se identificaron mutaciones intrónicas no relacionadas al fenotipo débil o parcial. La mutación del exón 1 c.46T>C, asociada al fenotipo DEL, fue identificada en 60% de las muestras, mientras que las mutaciones asociadas al fenotipo débil c.182G>T (exón 2), c.1148T>C (exón 8) y c.1154G>C (exón 9) fueron identificadas en el 14,29%, 11,43% y 2,78% de los pacientes respectivamente. El haplotipo con las mutaciones c.46T>C (exón 1), c.-368A>G (región 5’) y c.1154-31T>C (intrón 8) presentó la mayor frecuencia entre las muestras estudiadas (48,57%). Las cuatro mutaciones exónicas identificadas habían sido reportadas previamente en Argentina con prevalencias menores a las de Chile, pero mayores que las europeas. Estos resultados permiten conocer en mayor profundidad la diversidad genética del sistema Rh en pacientes chilenos con fenotipos DEL o débil, lo que presenta especial importancia clínica en transfusiones sanguíneas, transplantes y embarazos.

The blood groups are classified according to the antigens present in the red blood cells. In the Rh system is not always possible to determine the blood group unequivocally, in which case the patients are classified as weak or partial D. The D antigen is encoded by the RHD gene, and the genetic analysis of this gene can be used as a complementary tool to conventional serological methods. In the present study were sequenced the exons and the surrounding sequences of the RHD gene from 35 patients previously classified by immunological tests as weak or partial D. A mutation related to the weak or partial phenotype was identified in 31 of the 35 patients (88.57%), whereas in 5 patients only intronic mutations unrelated to the weak or partial phenotype were identified. The mutation of exon 1 c.46T>C, associated with the DEL phenotype, was identified in 60% of the samples, whereas the mutations associated with the weak phenotype c.182G>T (exon 2), c.1148T>C (exon 8) and c.1154G>C (exon 9) were identified in 14.29%, 11.43% and 2.78% of the patients respectively. The haplotype with the mutations c.46T>C (exon 1), c.-368A>G (5 'region) and c.1154-31T>C (intron 8) presented the highest frequency among the samples studied (48.57%). The four exonic mutations identified had previously been reported in Argentina with lower prevalences than those of Chile, but higher than those of Europe. These results allow knowing in greater depth the genetic diversity of the Rh system in Chilean patients with DEL or weak phenotypes, which has special clinical importance in blood transfusions, transplants and pregnancies.