Rol de siglec 2 y siglec 10 en la atenuación de la expresión y secreción de IL-10 por linfocitos B humanos

Abstract

Los linfocitos B reguladores (Bregs) se caracterizan por la producción de interleuquina 10 (IL 10), una de las principales moléculas inmunosupresoras, capaz de atenuar o prevenir enfermedades autoinmunes gracias a la disminución de la respuesta inflamatoria y la inhibición de células T efectoras. Para la secreción de IL-10 por Bregs humanas son necesarias señales de activación del receptor tipo Toll 9 (TLR9), del receptor de antígenos del linfocito B (BCR) o del receptor CD40. Estudios en ratones han demostrado que estas señales son inhibidas por receptores para ácido siálico, Siglecs, entre los que se encuentran Siglec 2/CD22 y Siglec 10/Siglec G. De acuerdo a estos antecedentes hemos generado la siguiente hipótesis: La expresión y secreción de IL-10 por linfocitos B humanos es atenuada por la activación de los receptores Siglec 2 y Siglec 10. Para responder la hipótesis se propuso una metodología mediante la cual caracterizamos mediante citometría de flujo (FACS) la expresión de estos receptores en poblaciones de linfocitos B humanos en reposo y activados mediante ligandos de TLR9, BCR y CD40. Además, mediante ELISA y FACS, evaluamos la secreción y expresión de IL-10, respectivamente, por linfocitos B activados con ligandos de TLR9, BCR y CD40, en presencia y ausencia de fracciones Fc de IgG humana, un agonista de los receptores Siglec 2 y Siglec 10. Finalmente, caracterizamos el rol de cada uno de estos Siglecs en la inhibición de la expresión y secreción de IL-10 por células B mediada por fracciones Fc de IgG humana, mediante el uso de un anticuerpo bloqueante para Siglec 10 y de un receptor Siglec 2 soluble recombinante. Nuestros resultados apuntan a que Siglec 2 y Siglec 10 se expresan en subpoblaciones de linfocitos B humanos de memoria, vírgenes y transicionales, tanto en reposo como tras ser activados a través de sus receptores TLR9, BCR y CD40. Además, se mostró que el fragmento cristalizable de IgG humana disminuye la secreción y expresión de IL-10 en linfocitos B humanos activados vía TLR9, BCR y CD40. Finalmente esta disminución en la secreción y expresión de IL-10 es mediada por Siglec 2 y Siglec 10, principalmente en lo que respecta a la estimulación vía CD40. En conclusión, se pudo comprobar que la señalización a través de Siglec 2 y Siglec 10 disminuye la secreción y expresión de IL-10 en linfocitos B reguladores, lo que pudiera interferir con su función supresora de la respuesta inmune.