CD73 restringe la adquisición de un fenotipo efector en linfocitos TCD8+.

Abstract

La adenosina es un nucleósido que inhibe la activación y función de los linfocitos T CD8+. Se ha descrito que la señalización de adenosina por medio del receptor A2A, regula negativamente las señales derivadas del reconocimiento antigénico mediadas por el receptor del linfocito T. La adenosina extracelular se produce principalmente mediante la hidrólisis de ATP, reacción catalizada por las ectonucleotidasas CD39 y CD73. En nuestro laboratorio hemos demostrado que la expresión de CD73 se induce tras la activación y se regula durante la diferenciación en los linfocitos T CD8+. Esta evidencia nos permite postular un potencial efecto de la adenosina generada por CD73 durante la diferenciación de los linfocitos T CD8+. En este trabajo, nos propusimos estudiar el rol de CD73 en los parámetros metabólicos y fenotípicos característicos de los linfocitos citotóxicos. Para lograr este objetivo, diferenciamos linfocitos T CD8+ en linfocitos citotóxicos de tipo 1 (Tc1) in vitro a partir de animales knockout para CD73 (CD73KO) y controles (WT). Los resultados obtenidos indican que los linfocitos Tc1 CD73KO presentan un mayor estado de activación que los linfocitos Tc1 WT, una mayor producción de IFN-, TNF- , granzima B y un aumento en la expresión de tbx21. Además, observamos un aumento en la captación de glucosa y capacidad bioenergética mitocondrial en los linfocitos Tc1 CD73KO en comparación con los linfocitos Tc1 WT, indicando que CD73 restringe el fitness metabólico. Finalmente, cuando transferimos adoptivamente linfocitos T CD8+ CD73KO antígeno especifico en un modelo de melanoma, éstos presentaron menor grado de agotamiento en comparación con los linfocitos T CD8+ WT. En conjunto estos resultados indican un efecto inhibitorio de la adenosina generada por CD73 en los linfocitos T CD8+, el cual restringe su capacidades citotóxicas como metabólicas, sugiriendo que intervenciones terapéuticas donde el eje principal sea la inhibición de la producción de adenosina por CD73, podrían mejorar el potencial citotóxico de los linfocitos T CD8+.

Adenosine is a nucleoside that inhibits CD8+ T cell activation and function. Reports have described that adenosine signaling via A2A receptor acts as a negative regulator of signals delivered by the T cell receptor. Extracellular adenosine is produced mainly by ATP hydrolysis, a reaction that is catalyzed by CD39 and CD73 ectonucleotidases. In our laboratory we have shown that CD73 expression is induced upon activation and regulated during CD8+ T cell differentiation. This evidence allows us to postulate a potential effect of CD73-generated adenosine during the differentiation of CD8+ T lymphocytes. In this study, we proposed to study the role of CD73 in the metabolic and phenotypic parameters of cytotoxic lymphocytes. To achieve this goal, we differentiated Tc1 lymphocytes from CD73KO and control mice (WT) in vitro. The results obtained indicate that, compared to WT Tc1 cells, CD73KO Tc1 cells have a higher activation status, increased IFN-, TNF- and granzyme B production, and increased mRNA expression of tbx21. In addition, our results indicate an increase in glucose uptake and mitochondrial bioenergetic capacity in CD73KO Tc1 lymphocytes compared to WT Tc1 cells, indicating that CD73 restricts metabolic fitness. Accordingly, when we adoptively transferred antigen-specific CD73KO CD8+ T lymphocytes to B16.OVA tumor bearing mice, these cells presented a lower degree of exhaustion compared to WT CD8+ T lymphocytes. Together these results indicate an inhibitory effect of CD73-generated adenosine on CD8+ T lymphocytes, which restrains their effector and metabolic capacity, suggesting that therapeutic interventions that target CD73-generated adenosine may enhance the cytotoxic potential of CD8+ T lymphocytes.