Rol de miR-515-5p en la diferenciación celular del trofoblasto inducida por Trypanosoma cruzi en un modelo de infección ex vivo

Abstract

RESUMEN El protozoo parásito zoonótico Trypanosoma cruzi es el agente causal de la enfermedad de Chagas. La transmisión congénita de T. cruzi es epidemiológicamente relevante aunque se reportan bajas tasas. Previamente hemos demostrado que el recambio epitelial del trofoblasto es parte de la respuesta antiparasitaria local de la placenta. El recambio epitelial implica la regulación de procesos celulares que incluyen a la proliferación, diferenciación y apoptosis y que además son regulados por el parásito. Por otro lado, la infección ex vivo de explantes placentarios humanos (HPE) con T. cruzi induce un perfil de miRNAs específico que incluye miRNAs placenta-específicos del cluster C19MC, tales como miR-515-5p. Interesantemente, este miRNA está relacionado con la regulación de la diferenciación del trofoblasto. MiR-515-5p regula la diferenciación del trofoblasto al inhibir a su blanco hGCM1(human glial cell missing-1 factor), que a su vez induce la expresión de otros genes fundamentales para la diferenciación. Así, durante la diferenciación del trofoblasto la expresión de miR-515-5p es inhibida. Aquí hemos evaluado los niveles de miR-515-5p durante la infección ex vivo de HPE con T. cruzi, además estandarizamos la sobreexpresión e inhibición de miR-515-5p con mimics y antagomirs y evaluamos su efecto sobre su blanco hGCM1. T. cruzi disminuye la expresión de miR-515-5p y aumenta la de hGCM1, la sobrexpresión de miR-515-5p no es capaz de revertir el efecto sobre los niveles de miR-515- 5p pero si revierte el aumento la expresión de hGCM1. Adicionalmente, la transfección con mimics y antagomirs no causa daño en los HPE. Se concluye, que la diferenciación de trofoblasto inducida por T. cruzi está mediada, al menos parcialmente, por la inhibición de miR-515-5p y el consecuente incremento en la expresión de su gen blanco hGCM1.

ABSTRACT

In order to determine reference values for hemogram and biochemical profile in Race thoroughbred foals between four and six months-old, the following study was carried out in Don Alberto´s farm in Los Angeles city, Chile. Sixty foals were used for this investigation, 7 ml of blood was extracted per specimen to perform hemogram and biochemical profile, which were carried out using automated equipment. The results were subjected to an exploratory data analysis, where the atypical values were identified and eliminated, descriptive statistics summary measures were obtained and the RVs were elaborated to hemogram and biochemical profile. Confidence intervals of 90% associated with the T- Student test, one-way variance analysis with Tukey's test, Pearson's correlation, linear regression analysis and p < 0.05 for the entire study were used. The results of hemogram and biochemical profile RVs based on sex variable reflected statistically differences in some parameters, for the hemogram these variables were: erythrocytes, PCV and hemoglobin, being higher in females. Regarding to biochemical profile, a significative difference was found in glucosa variable, it was also higher in females, turning out to be different from those existing in the literature.