Validación de un método analítico para la determinación de oxitetraciclina mediante la formación de par iónico

Abstract

EI límite máximo residual establecido para la OTC en músculo y piel de salmón, es '100 pg/Kg. Este último valor está por sobre el límite de cuantificación de un método analítico desarrollado para la determinación de oxitetraciclina en músculo de salmón basado en la formación de par iónico con el colorante violeta cristal en medio amoniacal, utilizando Ia técnica de espectrofotometría derivada de segundo orden. Para validar este método, se estudió sus fundamentos teóricos, luego se comprobó la formación del par iónico violeta cristal-oxitetraciclina mediante la reproducción de señales analíticas. En base a lo anterior, se propuso una forma distinta de realizar el procedimiento de determinación del par iónico, respecto al orden de adición de los reactivos. A continuación, se implementó este método y se identificaron los puntos críticos del proceso completo, así, se propusieron medidas para mejo.ar fa aplicación. En seguida, se reprodujeron espectros derivados de blancos de reactivos conteniendo también el músculo y piel de salmón, constatándose una dificultad para estabilizar el "zero crossing". Por lo anterior, se realizó una optimización de las variables volumen de violeta cristal y amoníaco, encontrándose que los valores óptimos son: 7x106 mol/L de YC y 2,4x10-3 mol/L de Nil3 para lograr valores más constantes del "zero crossing" del blanco. Finalmente, se aplicó el procedimiento completo a muestras fortificadas de músculo de salmón salmo salar con solución de OTC de concentraciones 3,0 pg/ml y 3,6 pg/ml y se verificó la formación del par iónico, sin embargo, no hubo diferencias entre las señales analíticas a estas dos concentraciones. Por lo tanto, se propuso un nuevo estudio de variables químicas y orden de adición de reactivos, pero ahora en presencia de ácido oxálico, antibiótico y matriz músculo de salmón.

The maximum residual limit established for the OTC in musde and skin of salmon, is 100 mg / kg. Th¡s last value is above the limit of quantification of an analytical method developed for the determination of oxytetracycline ¡n salmon muscle based on ion pair formaüon with the dye crystal üolet in ammoniacal medium using the technique of second-order derivative spectrophotometry. To validate th¡s method, it was studied their theoret¡cal foundations, then tested the ion pair format¡on of crystal violet-oxytetracycline by reproduc¡ng the analytical signals. Based on the above, it is proposed a different way of performing the procedure for determ¡ning the ion pair on the order with respect to addition of reagents. Subsequently, this method was implemented and the critical points of the compleie process were ident¡f¡ed in order to improve the ¡mplementation. Then, the der¡vative spectra from reagent blank contain also muscle and skin of salmon were reproduced, being verified a difficulty to stabilize the zero crossing. In this context, an optimization of the variable volume of VC and ammonia was canied out; found that the optimum values are: 7x10-6 mol/L of VC and 2,4 x10-3 mol/L of NH3 to achieve constant values of the blank '2ero crossing". Finally, the complete procedure was applied to fortified samples of musde of salmon salarwith OTC solution of concentrations 3,0 ¡.rglmL and 3,6 pg/ml and the ionic pair formation was verified, however, there were not diffe¡ences among the analytic s¡gnals to these two concentrations. Therefore, it is proposed a new study of chemical variables and order of addition of reagents, but now in presence of oxalic acid, antibiotic and salmon muscle nratríx.