Relación de la modificación post-traduccional de la microcina E492 con la vía de síntesis de la enteroquelina : efecto de la modificación sobre la actividad antibacteriana y la formación de fibras amiloides

Abstract

La microcina E492 es un péptido antibiótico de bajo peso molecular producido por Klebsiella pneumoniae RYC492. Hasta el momento se han descrito dos actividades para la microcina E492, una actividad bactericida mediante la formación de poros en la membrana interna de las cepas sensibles y una actividad citotóxica sobre algunas líneas celulares cancerosas. La microcina E492 puede sufrir un proceso de modificación post-traduccional, que consiste en la adición en su carboxilo terminal de una molécula de salmoquelina, un sideróforo de tipo catecol corespondiente a derivados glucosilados de enteroquelina. En este proceso de modificación postraduccional participan los productos de los genes de la maduración del sistema productor de microcina E492, los cuales invitro son capaces de glucosilar enteroquelina y unirla covalentemente a la serina 84 del péptido. El máximo de la actividad antibacteriana de la microcina E492 ocurre en fase exponencial de crecimiento y se correlaciona con el máximo en la expresión de los genes de la maduración, mientras que en fase estacionaria de crecimiento se observa la desaparición de la actividad antibacteriana acompañada por la agregación de la microcina E492 en fibras de tipo amiloide. Los agregados de tipo amiloide de la microcina E492 presentan una mayor actividad antitumoral.

Microcin E492 is a low-molecular we¡ght antibiotic peptide produced by Kebsiella pneumoniae RYC492. Until now have been described two act¡v¡ties for microcin E492, antibacterial activity through the formation of pores in the inner membrane of sensitive cells and a cytotox¡c activity against some cancerous cell l¡nes. M¡croc¡n E492 c.an undergo a post-translational modification process, which consists of the addit¡on of a salmocheline molecule, a catecholate siderophore corresponding to enterochel¡ne glucosylated derivatives, to its carboxyl terminal. The products of maturat¡on genes from the microcin E492 producing system, wh¡ch in vitro are capable of glucosylating enterocheline and covalently attaching it to the peptide's serine 84, participate in this process. The maximum antibacterial activ¡ty and the expression of maturat¡on genes are corelated, and both take place during the exponential phase of growth, meanwhile in stationary phase of growth we found a disappearance of antibacterial act¡vity accompanied by the assembly of microcin E492 amylold-l¡ke flbrils. Amyloid aggregates of microc¡n E492 have higher antitumor act¡v¡ty. This thes¡s studíed: i) the producing strain's requirements for the in v¡vo posltranslational modification of microcin E492 and also determ¡ned how th¡s modification affects iiD the antibacterial activity of the peptide and i¡i) its capacity to aggregate by forming amyloid-like fibrils.