Evaluación del efecto citotóxico del dominio periplasmático de FtsX

Abstract

Ftsx es una proteína del divisoma bacteriano que regula la hidr6lisis del peptido gljcano mediante su interacción con EnvC. Dada la conocida toxicidad de su sobre-expresión en E.coli y con el objetivo de explorar su posible uso como antibi6tjco, se trabaja con una quimera formada por el dominio periplasmatico de FtsX (V94-R223), un tag de 10 histidinas en el camino terminal y los ultimos17 aminoácidos de la microcina E492 en el extremo carboxilo terminal. La quimera se expresa en E.coli. C43 y se purifica mediante cromatografia de afinidad a cobalto y exclusión molecular. Se estima una masa molecular de 17 kDa de acuerdo a su migración en SDS-PAGE y de 21 kDa a partir del volumen de elucion observado en la cromatografia de exclusión molecular en estado nativo, de lo cual se dedujo que la proteína en estado nativo no seria globular como los estándares utilizados en la cromatografia de exclusion molecular.