Rol del miR-19b-2-5p en la infección de placenta humana inducida por trypanosoma cruzi en modelos in vitro y ex vivo

Abstract

La Tripanosomiasis americana, conocida como enfermedad de Chagas, es una patología zoonótica endémica de Latinoamérica cuyo agente etiológico es Trypanosoma cuzi, parásito protozoario de la clase kinetoplastea. La transmisión congénita de T. cruzi es epidemiológicamente relevante, aunque se reportan bajas tasas. Previamente hemos demostrado que el recambio epitelial del trofoblasto es parte de la respuesta antiparasitaria local de la placenta. El recambio epitelial implica la regulación de procesos celulares que incluyen la proliferación, diferenciación y apoptosis y que además son regulados por el parásito. Por otro lado, la infección ex vivo de explantes placentarios humanos (HPE) con T. cruzi induce un perfil de micro RNAs (miRNAs) específico que incluye al miR-19b-2-5p (miR-19b). Este miRNA regula negativamente la expresión del gen hCYP19A, que codifica a la aromatasa P450, y al gen codificante del factor de transcripción hGCM1. Así, durante la diferenciación del trofoblasto la expresión de miR-19b es inhibida. En la presente memoria de título hemos demostrado que: i) T. cruzi disminuye la expresión de miR-19b durante la infección ex vivo de explantes de placenta humana (HPE); ii) los HPE pueden ser efectivamente transfectados con mimics y antagomiR de miR-19b; iii) miR-19b modula la susceptibilidad a la infección con T. cruzi en HPE; y que iv) en una línea celular de trofoblasto los resultados no fueron concluyentes. Se concluye que la susceptibilidad a la infección en la placenta humana está mediada, al menos parcialmente, por miR-19b.

American Trypanosomiasis, commonly known as Chagas disease, is a zoonotic disease endemic to Latin America whose etiologic agent is Trypanosoma cruzi, a protozoan parasite of the class kinetoplast. Congenital transmission is a significant Public Health problem despite its low transmission rates. Previously, we have demonstrated that the epithelial turnover is part of local placental antiparasitic mechanisms. Furthermore, epithelial turnover implies regulating cellular processes that include proliferation, differentiation, and apoptosis. On the other hand, ex vivo infection of human placental explants with T. cruzi induces a specific miRNA profile that includes miR-19b-2-5p (miR-19b). Interestingly, this miRNA is related to trophoblast differentiation through inhibition of the transcription factor hGCM1(human glial cell missing-1 factor), which in turn induces the expression of other fundamental genes for trophoblast differentiation. Thus, during trophoblast differentiation, miR-19b expression is inhibited. Here we evaluated the possible role of miR-19b during ex vivo infection of human placental explants (HPE). Our results show that: i) T. cruzi decrease miR-19b expression during ex vivo infection of HPE; ii) HPE can be effectively transfected with miR-19b mimics and antagomirs; iii) iv) miR-19b modulate susceptibility of T. cruzi infection in HPE; and that iv) the results obtained in a trophoblastic cell line were not conclusive. We conclude that the susceptibility to ex vivo infection of human placental explants is at least partially mediated by miR-19b.