Efecto de la activación tipo-TH1 y tipo-TH2 de las células iNKT en la recombinación por cambio de clase de los anticuerpos

Abstract

La recombinación por cambio de clase de los anticuerpos (CSR) es un proceso molecular que requiere de la estricta interacción entre los linfocitos B participantes y linfocitos T helpers (TH). La activación de los linfocitos Th producirá la liberación de distintas citoquinas que definirán el isotipo generado por el linfocito B. Se ha descrito que las células Natural Killer T invariantes (iNKT) también puede participar en la activación de los linfocitos B mediante glicolípidos. Cuando las células iNKT reconocen α-Galactosilceramida (αGC), su ligando activador por excelencia, generan una potente producción de diversas citoquinas lo que significa una contribución ambigua en los isotipos que se generarán. Se desconoce cómo el uso de ligandos análogos de αGC capaces de inducir un perfil tipo-TH1 como tipo-TH2 de citoquinas, puede impactar en la CSR de los anticuerpos. En este trabajo se propone que la activación diferencial de células iNKT mediante liposomas que contienen glicolípidos con perfiles de activación tipo-TH1 o tipo-TH2 promueven la CSR a IgG2c o IgG1, respectivamente. Los liposomas que contienen el ligando tipo-TH1 AH10-7 y el antígeno modelo de linfocito B Ovalbumina (OVA) (LP/OVA/AH10-7), generó los mayores niveles de IgG2c e IgG3 séricos en relación con tratamiento sin glicolípido 7 días post inmunización. Los liposomas que contiene OVA y el glicolípido tipo-TH2 OCH (LP/OVA/OCH), indujeron los menores niveles de estos mismos isotipos, sin embargo, fue la preparación que generó los mayores niveles de IgG2b, otro isotipo involucrado en una activación tipo-TH1. LP/OVA/AH10-7 fue también el tratamiento que indujo el mayor porcentaje linfocitos Th foliculares (TFH) indicando que, junto al aumento en la población de linfocitos B IgM- IgD-, habría un aumento en la formación de los centros germinales. Esto se correlaciona con un aumento en la avidez relativa de los anticuerpos, con el número de linfocitos B de memoria (Bmem) en bazo y médula ósea, y número de células secretoras de anticuerpos (ASCs) IgG OVA-específicos. Estos datos en conjunto indican que esta ayuda de las células iNKT mediada por AH10-7 podría establecer con mayor eficiencia una población de linfocitos B de memoria y células plasmáticas de larga vida con anticuerpos de mayor afinidad. Estos antecedentes indican que las células iNKT tienen la capacidad de modular la cinética y magnitud del switch de clase hacia los distintos isotipos dependiendo del ligando activador. Importantemente, las citoquinas producidas por activación tipo TH-1 o tipo TH-2 de las células iNKT no tendría directa correlación con los isotipos que se generan de forma prevalente, como lo observado en una activación convencional por linfocitos TH1 o TH2. AH10-7 se presenta como un potente modulador de la CSR hacia los isotipos IgG2c, IgG3 y OCH hacia el isotipo IgG2b.

Class-Switch Recombination (CSR) is a molecular process that require the restrict interaction between B cells and T helper (TH) cells. The activation of TH cells will produce the cytokine delivery of distinct cytokines that will define the isotype generated by B cells. It has been described that invariant Natural Killer T cells (iNKT) also may participate in the activation of B cells through glycolipids. When iNKT cells recognize α-Galactosylceramide (αGC), its activator ligand par excellent, to generate a strong production of diverse cytokines, that mean, an ambiguous contribution in the isotypes that will be generated. It is unknown how the use of aGC-analogs able to induce a TH1-bias as well as TH2-bias cytokine profile, can impact on the CSR of antibodies. On this work is proposed that differential activation of iNKT through liposomes that contain glycolipid with th1-bias or th2-bias will promote the CSR to IgG2c or IgG1, respectively. The liposomes that contain the Th1-bias ligand AH10-7 and Ovalbumin (OVA), an antigen model of B cell (LP/OVA/AH10-7), generated the higher levels of circulating IgG2c and IgG3 in comparison with the treatment without ligands 7 days post immunization. The liposomes that contain OVA and the Th2-bias ligand OCH (LP/OVA/OCH) induced the lower levels of these same isotypes, however, it was the preparation that generated the higher IgG2b levels, another isotype involved in the Th1-bias activation. LP/OVA/AH10-7 was, also, the treatment that induced the higher percentage of T follicular helper (TFH) cells indicating that, joint to the rise in the B cell IgM- IgD- population, would be an increase in the germinal centers formation. This is correlated with an increase of relative avidity of antibodies, with the number of splenic and bone marrow memory B cells (Bmem), and the number of OVA-specific Antibody Secreting Cells (ASCs). These data together to indicate that this help given by iNKT cells through AH10-7 would stablish with a greater efficacy a Bmem population and long-lived plasma cells with antibodies with higher affinity. These antecedents to indicate that iNKT cells have the ability to modulate the kinetic and switch magnitude towards distinct isotypes depending on the activator ligand. Importantly, the cytokines involved in a Th1-bias or Th2-bias activation of iNKT cells are not directly correlated with the isotypes that are generated in a prevalent manner, how is observed in a conventional activation by TH1 or TH2 cells. AH10-7 is presented as a potent modulator of CSR toward IgG2c and IgG3 isotypes, and OCH slightly towards the IgG2b isotype.