Relación del receptor de quimioquinas CCR5 y del hemicanal Panexina-1 en la progresión del cáncer de colon

Abstract

CCR5 es un receptor de quimioquinas que se encuentra sobreexpresado en células tumorales de diversos tipos de cáncer, identificándose una correlación positiva entre la expresión de CCR5 y el estadio tumoral en cáncer colorrectal. Panexina-1 (PANX1) es un hemicanal de membrana que permite la liberación de ATP al medio extracelular; se ha descrito que esta proteína también se encuentra sobreexpresada en cáncer de colon comparado con tejido sano. Aunque se ha establecido que la activación de CCR5 induce la apertura de PANX1 en células T, esta relación no ha sido explorada en células tumorales. El objetivo de este trabajo fue evaluar la activación de PANX1, mediada por la activación de CCR5, a través de su participación en la proliferación de líneas celulares de cáncer de colon. Para esto, se evaluó la proliferación celular de la línea HCT 116 de cáncer colon humano, mediante el ensayo MTT, estimulando CCR5 con la quimioquina CCL4 en presencia o ausencia de inhibidores de CCR5 y PANX1. Asimismo, se utilizó un modelo in vivo de xenoinjerto de células HCT 116 en ratones BALB/c NOD-SCID inmunodeficientes, los que fueron expuestos a los inhibidores de CCR5 y PANX1, Maraviroc y Probenecid, respectivamente. Se midió el volumen tumoral periódicamente para evaluar el crecimiento tumoral, y, posteriormente, se evaluó la expresión de marcadores de proliferación (Ki67) y apoptosis (anexina V) por inmunohistoquímica indirecta. En el ensayo de proliferación in vitro identificamos que los inhibidores de CCR5 y PANX1 disminuyen la proliferación celular con respecto a los niveles basales; sin embargo, no se logró observar el vínculo entre CCR5 y PANX1. En el modelo in vivo, se observó que el tratamiento con inhibidores de CCR5 y PANX disminuye el volumen tumoral, el que está asociado con una menor expresión del marcador de proliferación Ki67 en los tumores. Estos resultados sugieren que CCR5 y PANX1 participan en la progresión del cáncer de colon. Consideramos que es importante profundizar en el estudio de la relación entre ambas moléculas, y, encaminar nuevas estrategias de tratamiento antitumoral a futuro.

CCR5 is a chemokine receptor that is overexpressed on tumor cells of various types of cancer, such as colorectal cancer, in which a positive correlation between CCR5 expression and tumor stage has been described. Pannexin-1 (PANX1), a membrane hemichannel that allows the release of ATP into the extracellular medium, is also overexpressed in colon cancer compared to healthy tissue. Although the link between CCR5 and PANX1 has been established, where CCR5 activation induces PANX1 opening in T cells, this relationship has not been explored in tumor cells. This work aimed to evaluate whether PANX1 activation, mediated by CCR5 activation, participates in cell proliferation in a colon cancer cell line. For this purpose, cell proliferation of the HCT 116 human colon cancer cell line was evaluated, using the MTT assay, by stimulating CCR5 with its ligand CCL4 in the presence or absence of CCR5 and PANX1 inhibitors. In addition, we performed an in vivo study using a xenograft murine model of HCT 116 cells inoculated into BALB/c NOD-SCID immunodeficient mice, which were exposed to CCR5 and PANX1 inhibitors, Maraviroc and Probenecid, respectively. Tumor volume was measured periodically to evaluate tumor growth, and, subsequently, the expression of proliferation (Ki67) and apoptosis (annexin V) markers were evaluated by indirect immunohistochemistry. In the in vitro proliferation assay, we observed that CCR5 and PANX1 inhibitors decreased cell proliferation in comparison to basal levels; however, no link between CCR5 and PANX1 could be detected. In the in vivo model, treatment with CCR5 and PANX inhibitors decreased tumor volume, which was associated with a lower expression of the proliferation marker Ki67 in tumors. These results suggest that CCR5 and PANX1 are involved in tumor progression in colon cancer. We consider that it is important to further study the relationship between both molecules, which may bring new data for the development of new strategies for future anti-tumor treatment.