Bloqueo farmacológico de los receptores [beta]-adrenérgicos en ratas en el periodo de subfertilidad

Abstract

En la actualidad la mujer ha decido posponer la maternidad hasta después de los 30 años. El aplazar la maternidad hacia la ventana de subfertilidad (31 a 41 años), provoca una disminución de la fertilidad y en el éxito de los programas de fertilización in vitro, los cuales poseen estrechos márgenes de éxito, que se hacen cada vez más pequeños conforme va aumentando la edad de las mujeres. Por esta razón es necesario conocer los mecanismos involucrados en el envejecimiento ovárico, durante el periodo de subfertilidad femenino. Para ello se ha utilizado el modelo múrido, debido a su similitud con procesos que regulan la función del ovario en el ser humano, considerándose como un buen modelo para comprender los mecanismos involucrados en el envejecimiento reproductivo. Se ha demostrado que durante el periodo de sub-fertilidad y en mujeres menopáusicas, los ovarios presentan características fisiológicas similares a las encontradas en el Síndrome de ovario poliquístico, patología de alta prevalencia en mujeres durante edad fértil. Estas observaciones se basan en el hecho de que en ambas condiciones existe un retraso en el desarrollo folicular, disminución del número de folículos antrales y la aparición de estructuras quísticas, que prevalecen incluso después de la menopausia. Se ha descrito que uno de los factores que participa en la aparición de estas condiciones es el aumento del tono nervioso simpático y del contenido de noradrenalina (NA) intraovárica, la que ejerce su función a través de la activación de los receptores 2-adrenérgicos. Este aumento en la actividad nerviosa simpática del ovario se ha relacionado con un aumento en la secreción de hormonas esteroidales y la mantención y/o aparición de las estructuras quísticas, lo que conduce a problemas de fertilidad. Para disminuir la estimulación del sistema nervioso simpático sobre el ovario en el periodo de subfertilidad de la rata (8 a 10 meses), y para determinar si la NA participa en el cese de la función ovárica y/o formación de los quistes foliculares, se propuso bloquear la acción de los receptores -adrenérgicos. Para ello, se administró una inyección diaria de propranolol (antagonista -adrenérgico), durante 2 meses a ratas que se encuentran en el periodo de subfertilidad. Después de los dos meses de tratamiento se analizó la ciclicidad estral de la rata por medio de la observación microscópica del frotis vaginal, se determinaron las hormonas esteroidales en plasma mediante EIA, la concentración de NA y su metabolito MHPG en ovario mediante HPLC; además se realizó análisis morfológico de los ovarios. Los resultados muestran que el bloqueo -adrenérgico con propranolol permite reactivar el desarrollo folicular. Esto evidenciado por: a) el aumento en el número de folículos antrales sanos y cuerpos lúteos, b) el aumento del porcentaje de ovulación y los niveles de hormonas esteroidales en el plasma, c) la disminución en el número de folículos quísticos (quistes y prequistes) y el tamaño de los folículos tipo III y prequistes. Considerando que durante el envejecimiento existe un aumento del tono adrenérgico sobre el ovario, que podría resultar perjudicial, hemos logrado, mediante el bloqueo - adrenérgico, mejorar la funcionalidad ovárica. Este tratamiento reactivó el desarrollo folicular, evidenciado en la recuperación de la esteroidogénesis y foliculogénesis, dando a este fármaco expectativas para su uso a nivel clínico como terapia de ayuda, para poder expandir o retrasar la ventana de subfertilidad en la mujer

Today women have decided to postpone childbearing even after their thirties. The delay of the motherhood towards the subfertility period is associated to diminished fertility and a decreased success rate in in vitro fertilization programs, the latter being rarely successful and even less successful as women get older. For this reason it became necessary to understand the mechanisms related to ovarian ageing during the subfertility period. To accomplish this, the murine model has been used, because it describes almost all the process that regulates the ovarian function in humans, therefore is a good model for understanding the mechanisms involved in the reproductive aging. It has been show that during the sub-fertility and the menopausal period in woman, the ovaries present physiological characteristics similar to those found in the polycystic ovarian syndrome, the pathology with the highest prevalence in women during the fertility age. The observations are based, for example, in the delay in follicular development, decreased number of antral follicles and the spontaneous generation of cystic structures, that prevail until the menopausal age. Today we know one of the factors that participates in the generation of this condition is the rise in the sympathetic tone and the noradrenaline (NA) released in the ovary, which exerts his function through the 2-adrenergic receptor activation. That is correlated with the steroid hormone secretion and the maintenance or generation of the cystic structures, leading to fertility issues. To inhibit the effect in the rise of the sympathetic tone in the ovary during the sub fertility period, and to determine if the NA participates in the cessations of the ovarian function and/or follicular cyst formation and maintenance, we propose a pharmacological block the - adrenergic receptors. To achieve this we administered propranolol, a -adrenergic receptors antagonist, in a daily injection for 2 months, to rats that have reached the sub fertility period (8 and 10 months old). After 2 months of propranolol treatment, estrous cyclicity was analyzed through vaginal smear, steroidal hormones were analyzed in plasma through EIA, the NA content and one of its metabolites was measured in HPLC and finally we performed a morphological analysis of the complete ovary. The results show that the -adrenergic blockade allows reactivation of the follicular development, which is evidenced by an increase in: a) healthy antral follicles and corpora lutea amount, b) ovulation percentage and esteroidal hormones levels in plasma, and c) decreased amount of cystic follicles (cyst and precyst) and in the follicles size (type III follicles and precyst). Therefore we can observe an activation in follicular development that leads to ovulation and inhibits the cyst formation pathway. During aging there is an increase in the ovarian adrenergic tone. After the -adrenergic blockade, we could see the improvement of the ovarian function and follicular development, as evidenced by the rise in the steroidogenesis and folliculogenesis. These findings let us propose propranolol for use in clinical trials as a clinical therapy help, to expand or delay the sub fertility period in the woman