Efecto antibiofilm de la aspirina liberadora de óxido nítrico NCX-4040 en presencia de fluconazol, sobre Candida albicans aisladas de pacientes con estomatitis protésica

Abstract

La creciente resistencia a los fármacos antifúngicos es un problema de salud pública mundial. Según estadísticas de la Organización Mundial de la Salud (OMS), las infecciones por estos patógenos han aumentado por diversas causas entre las que se encuentran el aumento de pacientes inmunocomprometidos y el uso masivo de antibióticos de amplio espectro. Lo más alarmante es la alta tasa de morbilidad que exhibe este tipo de infecciones, las que se asocian con una alta tasa de resistencia a los fármacos actualmente ocupados. Uno de los mecanismos de resistencia más relevantes es la formación de biofilms, que se definen como comunidades microbianas rodeadas por una matriz de sustancias poliméricas extracelulares, la cual les otorgaría una protección mecánica frente a la acción de antimicrobianos. Una de las patologías donde la formación de biofilms está directamente asociada con el fracaso terapéutico es la estomatitis protésica, una inflamación crónica de la mucosa oral en contacto con una prótesis removible y que tiene una directa asociación con la presencia de biofilms de levaduras del género Candida. Por estas razones es de gran interés investigar novedosas estrategias farmacológicas para reducir o revertir los biofilms. Debido al escaso desarrollo de nuevas moléculas antifúngicas, es que se ha buscado potenciar el efecto de los antifúngicos convencionales con fármacos “no antimicrobianos”. En este sentido, se ha descrito que los antiinflamatorios no esteroidales (AINES), que inhiben la formación de prostaglandinas, poseen efecto antibiofilm. Esto estaría relacionado con el rol de la Prostaglandina E2 en los procesos claves involucrados en la formación de biofilms; entre ellos, la morfogénesis de Candida y la adhesión a superficies abióticas. Entre los AINES destaca la aspirina que es la que ha presentado mejor efecto antibiofilm. Otra molécula de interés como agente antimicrobiano, es el óxido nítrico (NO), cuya acción se ha ensayado con compuestos dadores de NO como el nitroprusiato de sodio o el isosorbide mononitrato. Estos han presentado efectos antibiofilm presumiblemente por los efectos antimicrobianos que presentan el NO y por su capacidad como inmunomodulador. Por estas razones en esta investigación se evaluó el efecto antibiofilm de la aspirina liberadora de óxido nítrico, cuya estructura aparece en la Figura 1; en este caso el efecto sobre los biofilms sería dual. En este trabajo se determinó la susceptibilidad a fluconazol de los aislados clínicos de C. albicans y se cuantificó el efecto antibiofilm de la aspirina liberadora de óxido nítrico. Para este efecto, se evaluaron los siguientes parámetros: adhesión, morfogénesis, morfología de los biofilms y viabilidad de los biofilms en presencia de fluconazol y aspirina liberadora de óxido nítrico. Este último fármaco fue eficaz sobre los biofilms, pero su efecto no fue sinérgico en presencia de fluconazol, confirmando que fluconazol no presenta efecto antifúngico frente a los biofilms. Estos resultados son prometedores y nuevos estudios están en progreso para confirmar su posible uso en este tipo de patologías

The growing resistance to antifungal drugs is a global public health problem. According to statistics from the World Health Organization (WHO), infections with these pathogens have increased for various reasons, among which are the increase of immunocompromised patients and the widespread use of broadspectrum antibiotics. Most alarming is the high rate of morbidity exhibiting these infections, which are associated with a high rate of resistance to drugs currently occupied. One of the most important mechanisms of resistance is the formation of biofilms, which are defined as microbial communities surrounded by a matrix of extracellular polymeric substances, which would provide them with mechanical protection against the action of antimicrobials. One of the conditions where the formation of biofilms is directly associated with treatment failure is denture stomatitis, a chronic inflammation of the oral mucosa in contact with a removable prosthesis and has a direct association with the presence of biofilms of Candida yeasts. For these reasons it is of great interest to investigate novel pharmacological strategies to reduce or reverse the biofilms. Due to the limited development of new antifungal molecules it is that they have sought to enhance the effect of conventional antifungals with "no antimicrobial" drugs. In this regard, it described those nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) which inhibit the formation of prostaglandins, have antibiofilm effect. This would be related to the role of Prostaglandin E2 in the key processes involved in the formation of biofilms; including Candida morphogenesis and adherence to abiotic surfaces. Among the highlights NSAIDs aspirin presents the antibiofilm best effect. Another molecule of interest as an antimicrobial agent is nitric oxide (NO), whose action has been tested with NO donor compounds such as sodium nitroprusside or isosorbide mononitrate. These have presented antibiofilm effects presumably by antimicrobial effects of NO and its ability as an immunomodulatory agent. For these reasons in this investigation antibiofilm effect of aspirin releasing nitric oxide, was evaluated; in this case the effect on biofilms would be dual. Therefore, we evaluated fluconazole susceptibility of C. albicans clinical isolates and quantified the antibiofilm effect of aspirin releasing nitric oxide. For this purpose, adhesion, morphogenesis, morphology and viability of biofilms in the presence of fluconazole biofilms and aspirin releasing nitric oxide were evaluated. The latter drug was effective against biofilms, but its effect was not synergistic with those of fluconazole. This confirmed that fluconazole have no effect against biofilms. These results are promising and further studies are in progress to confirm their possible use in this type of pathology