Evaluación in vitro del efecto citotóxico de kaempferol en combinación con cisplatino sobre carcinoma orofaríngeo

Abstract

El cáncer es un conjunto de enfermedades en la que existe formación de células atípicas que tienen la capacidad de proliferar descontroladamente, invadir tejidos adyacentes y propagarse a otros órganos del cuerpo. Según la Organización Mundial de la Salud (OMS) es la segunda causa de muerte a nivel global después de las enfermedades cardiovasculares.

El carcinoma espinocelular oral es una neoplasia maligna del epitelio estratificado plano de etiología multifactorial, con mal pronóstico en estados avanzados y gran capacidad de generar metástasis a ganglios linfáticos cervicales.

Kaempferol es un polifenol de la familia de los flavonoides que se encuentra en variados frutos y vegetales, sus propiedades se atribuyen a su capacidad de inducir apoptosis a través de la vía extrínseca e intrínseca. Los mecanismos incluyen activación de receptores nucleares e inhibición de factores de crecimiento tales como algunas metaloproteinasas de la matriz, disminuyendo la invasión y migración de estas células. Se describe que podría inhibir el complejo I de la cadena transportadora de electrones en la mitocondria, disminuyendo su actividad enzimática y la posterior síntesis de ATP. El objetivo de este trabajo fue evaluar la potencia a través de la determinación de la concentración efectiva 50 (EC50) de kaempferol en células de carcinoma de células escamosas de lengua (CAL 27), carcinoma de células escamosas de laringe (Hep-2) y queratinocitos displásicos (DOK) mediante la técnica de MTT y rojo neutro. También se determinará el efecto de kaempferol en la capacidad de migración de CAL 27 mediante los métodos de herida y transwell, y la capacidad de formar colonias a través de un ensayo clonogénico. Además, se evaluó el efecto de la combinación de kaempferol con cisplatino a concentraciones crecientes en CAL 27 y el efecto de kaempferol sobre el consumo de oxígeno a través de oxigrafía y los niveles intracelulares de ATP a través de luminiscencia.

Se obtuvieron EC50 de 143µM y 120µM para kaempferol en CAL 27, EC50de 111µM y 104µM en Hep-2 a las 48 y 72 horas respectivamente. El EC50 fue no determinable en células DOK. Se observó además, una disminución significativa en la migración de las células tumorales y de la viabilidad de CAL 27 expuestas a la combinación con cisplatino. También se produjo una inhibición en la tasa de consumo de oxígeno y los niveles intracelulares de ATP. Sin embargo, no se observó una disminución significativa en el número de las colonias formadas respecto al control en presencia de kaempferol.

En conclusión, se observó un efecto significativo y selectivo de kaempferol sobre la viabilidad de CAL 27 y HEp-2, afectando en gran medida su capacidad de migración e inhibiendo el funcionamiento mitocondrial de estas células.