Caracterización de la isla genómica IG-asnT de Salmonella enterica y su papel en la interacción del serovar Enteritidis con macrófagos murinos

Abstract

Salmonella Enteritidis es actualmente el serovar de Salmonella más prevalente a nivel mundial. Mediante el análisis bioinformático de los genomas de distintos serovares de Salmonella identificamos una región genómica que se encuentra presente en S. Enteritidis, así como en S. Gallinarum y S. Dublin (serovares filogenéticamente cercanos a S. Enteritidis). Esta región corresponde a una Isla de Patogenicidad, la cual denominamos IG-asnT. Resultados obtenidos en nuestro laboratorio sugieren que varias de las proteínas codificadas en IG-asnT de S. Enteritidis participarían en la colonización de órganos internos de ratón en un modelo de virulencia in vivo. Entre ellas se encuentran proteínas estructurales de un pilus tipo IV (SEN1977), una proteína involucrada en movilización de plasmidios (SEN1980) y TlpA (TIR-like protein A), la cual presenta un dominio con homología a proteínas que participan en respuestas inflamatorias de células del sistema inmune. Debido a que la capacidad de Salmonella para sobrevivir en los macrófagos de su hospedero es un factor indispensable para su diseminación sistémica y la posterior colonización de órganos blanco, en este proyecto nos propusimos determinar si la isla IG-asnT codifica productos génicos que cumplen un papel en la interacción de S. Enteritidis con macrófagos murinos y definir si al menos uno de ellos participa en la producción y/o secreción de la proteína TlpA. Para esto, se estudió la capacidad de varias mutantes de genes presentes en IG-asnT para sobrevivir al interior de macrófagos murinos, de las cuales las mutantes SEN1977, SEN1980 y tlpA presentaron una capacidad disminuida de supervivencia en estos macrófagos en comparación a la cepa silvestre. Por otra parte, nuestros resultados indican que tlpA participa en el proceso que lleva a la muerte celular de los macrófagos infectados con S. Enteritidis. Pudimos determinar que TlpA se produce en distintas condiciones de cultivo in vitro, además de expresarse al interior de los macrófagos infectados. El resto de los genes presentes en la isla no participan en la expresión ni en la producción de la proteína TlpA en las condiciones estudiadas. Estos resultados entregan nueva evidencia sobre factores de virulencia de S. Enteritidis involucrados en su adaptación a células hospederas, que podrían explicar en parte su prevalencia sobre otros serovares.