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Professor Advisordc.contributor.advisorLara Peñaloza, Hernánes_CL
Professor Advisordc.contributor.advisorFiedler Temer, Jennyes_CL
Authordc.contributor.authorJara Picas, Pablo Enriquees_CL
Admission datedc.date.accessioned2012-09-12T18:24:00Z
Available datedc.date.available2012-09-12T18:24:00Z
Publication datedc.date.issued2007es_CL
Identifierdc.identifier.urihttps://repositorio.uchile.cl/handle/2250/105241
Abstractdc.description.abstractLa función ovárica es regulada a través de una vía endocrina y por una vía neuronal. Un aumento prolongado en la actividad nerviosa simpática se encuentra causalmente relacionado con la formación de quistes ováricos. Estudios de nuestro laboratorio han establecido que la exposición a 4 ºC y la administración intracerebroventricular de la hormona liberadora de tirotropina (TRH), aumentan la actividad simpática del ovario. Estudios funcionales y morfológicos han establecido que el origen de la vía neuronal del ovario proviene del hipotálamo y específicamente desde el núcleo paraventricular (NPV). El NPV es una estructura que sintetiza variadas hormonas y participa además en la modulación de respuestas fisiológicas frente al estrés. Una de las hormonas que se sintetiza en el NPV y que cumple esta función es la TRH, la que es secretada desde la eminencia media (EM) donde regula el eje hipotálamo-hipófisis-tiroides. Además esta hormona en forma independiente de la vía endocrina ejerce funciones en estructuras del sistema nervioso central. El NPV es ampliamente regulado por variados neurotransmisores como noradrenalina, acetilcolina, glutamato y GABA. Terminales nerviosos glutamato y GABA, forman contactos sinápticos con neuronas TRHérgicas los que activan o inhiben neuronas del NPV. Sin embargo, no se ha destacado la participación de estos neurotransmisores en la funcionalidad de las neuronas TRHérgicas del NPV, como tampoco su participación en la respuesta frente a la exposición a 4 ºC, por lo que, se planteó como hipótesis de trabajo: “La secreción de la TRH desde las neuronas del NPV aumenta en respuesta a la exposición a 4 ºC siendo el glutamato y GABA los neurotransmisores que controlan estos cambios” Para resolver la hipótesis usamos ratas Sprague-Dawley adultas, las cuales fueron divididas en un grupo control y otro estresado por exposición a 4 ºC por 48 y 64 horas. En este modelo experimental demostramos que la exposición a 4 ºC activó las neuronas TRHérgicas del NPV demostrado por el aumento de la expresión del mRNA de la TRH por hibridación in situ y su inmunorreactividad en el NPV, aumentando tanto en la región parvocelular que es la característica de las neuronas TRHérgicas, como en la región neuroendocrina magnocelular, donde se ha descrito la presencia de inmunorreactividad de la TRH, pero no su funcionalidad. Complementario a los cambios en la expresión e inmunorreactividad de la TRH, se observó in vivo mediante el implante y perfusión de cánula push-pull, que la exposición a 4 ºC por 64 horas estimuló la secreción de la TRH (determinado por radioinmunoensayo) desde la región magnocelular del NPV. La secreción local de la TRH corresponde a la secreción dendrítica que se ha observado en las neuronas de la región magnocelular para las neuronas oxitocinérgicas y vasopresinérgicas, pero no descrito para las neuronas TRHérgicas. Por otra parte, se determinó por perfusión push-pull in vivo, que la exposición a 4 ºC aumentó la liberación de glutamato y se mantuvo la de GABA comparado con las ratas controles, sugiriendo que estos neurotransmisores están involucrados en la secreción de la TRH. Para conocer la participación de glutamato y GABA en la regulación de las neuronas TRHérgicas, se analizó la TRH secretada mediante estudios in vitro de cortes de NPV y EM. Estos estudios determinaron que la inhibición farmacológica de los receptores ionotrópicos de GABA con el antagonista competitivo bicuculina, estimulan la secreción basal de la TRH en las ratas expuestas a 4 ºC. El aumento en la secreción de la TRH fue bloqueado al utilizar MK-801 (50 M), antagonista no-competitivo de los receptores NMDA de glutamato, confirmando la participación de la inervación glutamatérgica y GABAérgica en la exposición a 4 ºC. Sin embargo no se puede descartar la participación de otros neurotransmisores que inervan y regulan la funcionalidad del NPV. A nivel de la EM, encontramos que la exposición a 4 ºC disminuyó la concentración de la TRH, lo que se relacionó directamente con un aumento en la secreción basal y estimulada. El conjunto de estos resultados nos indican que el aumento en la secreción de la TRH desde el NPV inducida por la exposición a 4 ºC, es principalmente regulado por los sistemas glutamatérgicos y GABAérgicos, los cuales se constituyen en componentes claves de los cambios en la actividad nerviosa central que da origen a la vía nerviosa que controla la función ovárica.
Abstractdc.description.abstractThe ovarian function is regulated by endocrine and neuronal pathways, where a prolonged increase in the sympathetic nervous activity is causally related to the development of ovarian cysts. Studies from our laboratory have established that the exposure to cold and the intracerebroventricular administration of the thyrotropin-releasing hormone (TRH) increases the sympathetic nervous activity that innervates the ovary. Functional and morphological studies have established that the origin of the neural network that innervates the ovary originates in the hypothalamus and specifically the paraventricular nucleus (PVN). PVN is not only the nucleus where many hormones are synthesized but also is responsible to modulate physiological responses to stress. One of the hormones that is synthesized in the NPV that fulfills this function is TRH, who is released from the median eminence (ME) and regulates the endocrine function of the hypothalamus-pituitary-thyroid axis and to presents no-endocrine functions. The PVN is widely regulated by several neurotransmitters like noradrenaline, acetylcholine, glutamate and GABA. The glutamatergic and GABAergic neurotransmission activate and inhibit neurons of the PVN respectively. Both type of neurons have synaptic contacts with TRH neurons, however, the participation of these neurotransmitters to the function of TRH neurons in the PVN has not been described and also their participation in the response of the neurons to exposure to cold stress. Thus the hypothesis of this work is: “TRH release from the PVN neurons increases in response to cold stress being glutamate and GABA the neurotransmitters that are controlling these changes” To solve the hypothesis, we used Sprague-Dawley adults rats, which were divided in control and cold stressed rats at 4 ºC for 48 and 64 hours. In this experimental model we demonstrated that cold stress activated TRH neurons of the NPV, which was demonstrated by the increase in the expression TRH mRNA demonstrated by in situ hybridization and its immunoreactivity in the PVN, in the parvocelular region that it is the characteristic of the TRH neurons, and in the magnocellular neuroendocrine region, where the presence of immunoreactivity of TRH has been described, but not its functionality. In addition to the changes in the expression and immunoreactivity of TRH, we used in vivo push-pull cannulae perfusion and we demonstrated that cold stress during 64 hours stimulated the TRH release (measured for radioimmunoassay) from the magnocellular region of the PVN. This is a dendritic release that has been previously observed in the magnocellular region for oxytocinergic and vasopressinergic neurones, but described for the first time in TRHergic neurons. In addition, through the push-pull perfusion we found an increase of glutamate and GABA released in stressed rats compared with control rats, suggesting that these neurotransmitters are involved in the TRH release. To know the participation of glutamate and GABA in the regulation of the TRHergic neurons, we analyzed the in vitro release of TRH from tissue slices from PVN and from ME. Pharmacological inhibition of the ionotropic GABA receptors with the competitive antagonist bicuculline, stimulated the basal TRH release in the stressed rats. The increases in the basal TRH release was blocked by the addition of MK-801 (non-competitive antagonist of the glutamate NMDA receptors), confirming the participation of glutamatergic and GABAergic innervation in the control of TRH release and - without discarding the participation of other neurotransmitters that are innervated and regulating the functionality of the PVN - in the control of TRH release under cold stress condition. In ME (nerve terminal), we found that cold stress decreased the TRH concentration and increased both basal and stimulated release in a manner that was independent of GABAergic neurotransmission. Altogether these results indicated that the regulation of the increased TRH release from the PVN induced by cold stress was mainly regulated by glutamatergic and GABAergic neurotransmission, which are then constituted in key components of the changes in the central nervous activity at the origin of the nervous pathway that controls the ovary function.
Lenguagedc.language.isoeses_CL
Publisherdc.publisherUniversidad de Chilees_CL
Keywordsdc.subjectTirotropinaes_CL
Keywordsdc.subjectEfecto del desprendimiento de tirotropinaes_CL
Títulodc.titleRegulación de la secreción neuronal de la hormona liberadora de tirotropina en el núcleo paraventricular del hipotálamo : participación de la neurotransmisión glutamatérgica y gabaérgica y sus cambios por la exposición al fríoes_CL
Document typedc.typeTesis
dc.description.versiondc.description.versionVersión original del autor
dcterms.accessRightsdcterms.accessRightsAcceso solo a metadatos
Facultyuchile.facultadFacultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas
uchile.carrerauchile.carreraQuímica y Farmacia
uchile.gradoacademicouchile.gradoacademicoDoctorado
uchile.notadetesisuchile.notadetesisTesis para optar al grado académico de Doctor en Farmacología


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