Evaluación de la actividad analgésica aguda y crónica de Phytolacca dioica

Abstract

Phytolacca dioica(ombú) proviene de una familia que consta de árboles, arbustos o hierbas leñosas, principalmente de climas tropicales y subtropicales, con una gran presencia en Argentina, Uruguay y Chile. Análisis fitoquímicos en varias especies del género Phytolacca muestran que son ricas en saponinas. Dichas especies además han sido descritas por poseer una importante actividad biológica molusquicida, antiinflamatoria y antifúngica (Escalante y col., 2002). Desde los frutos (bayas) de ombú se obtuvieron tres extractos: EDCM, EM y EB, ocupados para evaluar una posible actividad analgésica debido a que se usa tradicionalmente por su actividad antiinflamatoria y se sabe que ambas propiedades están estrechamente relacionadas. Los ensayos preliminares mostraron que el EDCM contiene principalmente sustancias triterpénicas, el EM flavonoides y el EB mayoritariamente saponinas triterpénicas además de flavonoides glicosilados. Para evaluar analgesia aguda se ocupó el ensayo retirada de la cola (Tail-Flick), probando tópicamente 6, 3, 1 y 0,5 %p/v (g/ml) por peso de ratón obteniendo EC505,2 ± 0,9; 2,9 ± 0,2 y 2,2 ± 0,1 para el EDCM, EM y EB respectivamente. Otro ensayo realizado para evaluar analgesia aguda fue la placa caliente (Hot-Plate) probando dosis intraperitonealmente de 600, 300, 100 y 50 mg/kg por peso de ratón obteniendo ED50 para el EDCM 548,4 ± 93,9 y para EM 217,8 ± 21,6. La administración ip de 600 mg/kg del extracto butanólico resultó ser tóxica entonces se probaron 300, 200, 100 y 50 mg/kg intraperitonealmente para dicho extracto obteniendo como ED50123,3 ± 4,2. Al obtener las respectivas ED50 (en la placa caliente) se las evaluó en presencia de CFA (complete Freund’s adjuvant) a las 24 hrs y a los 7 días, además se incluyó la tinción con Evan`s blue para evaluar progresión del edema generado en la pata derecha del ratón. En el HP/CFA de 24 hrs al probar 123 mg/kg ip del extracto butanólico hubo signos de intoxicación entonces se probó en este caso la ED25 45 mg/kg obteniendo %MPE 68,9 ± 12,5. Para los EDCM y EM se obtuvo 68,9 ± 10,7 y 65,9 ± 9,9 %MPE respectivamente. En el HP/CFA de 7 días los %MPE fueron 46,0 ± 7,7; 42,9 ± 7,3 y 80 ± 12,3 para EDCM, EM y EB respectivamente. La extravasación a las 24 hrs no mostró ser menor que la del control negativo para ninguno de los extractos y al comparar a los 7 días se obtuvo una discreta disminución con los extractos metanólico y butanólico.

Según los resultados obtenidos de los distintos ensayos (TF, HP y CFA/HP) fue el extracto butanólico quien tendría la mayor actividad analgésica. Dicha actividad fue mucho menor al compararla con el efecto del fármaco de referencia (ibuprofeno) en cada ensayo.

Mediante el ensayo de decoloración con DPPH se evaluó la capacidad antiradicalaria de los EM y EB obteniendo IC50 197 y 30 µg/ml respectivamente, lo que refleja una discreta actividad antioxidante

Phytolacca dioica (ombú) come from family consist of trees , shrubs or woody herbs, most of tropical and subtropical climate. With abundant presence in Argentine, Uruguay and Chile. Fitochemestry analisis in various Phytolacca genus species show are rich in saponins. Such species have been describes to have an important biological activity molusquicide, anti inflamatory and fungicide too (Escalante y col., 2002). Three extracts (EDCM, EM and EB) were obtained from ombú fruits (berries), used for evaluate possible analgesic activity because ombú is traditionally used due to antinflamatory activity and is know that both of propierties are closely related. The preliminary assays show EDCM contain triterpenic substances, EM flavonoids and EB most of triterpenic saponins apart from glicosilates flavonoids. For testing acute analgesia it used Tail-Flick assay , testing topical dose: 6, 3, 1 y 0,5 %w/v mouse weight obtaining EC50 5,2 ± 0,9; 2,9 ± 0,2 y 2,2 ± 0,1 for EDCM, EM y EB respectively. Other assay realized for acute analgesia evaluate was Hot- Plate testing intraperitonaly dose: 600, 300, 100 y 50 mg/kg mouse weight obtaining ED50 for DCM 548,4 ± 93,9 and for EM 217,8 ± 21,6. The intraperitonaly administration of 600 mg/kg butanolic extract result to be toxic then was testing 300, 200, 100 y 50 mg/kg intraperitonaly obtaining ED50 123,3 ± 4,2 for such extract. At obtaining the respectives ED50 (in Hot-Plate assay) was evaluated in presence of CFA (complete Freund’s adjuvant) at 24 hours and 7 days, was included Evan`s blue tintion for evaluate progress of generated edema in the mouse right foot. In the 24 hours HP/CFA at testing 123 mg/kg ip of butanolic extract had intoxications signs then testing in this case ED25 45 mg/kg obtaining %MPE 68,9 ± 12,5. For EDCM y EM was obtain 68,9 ± 10,7 and 65,9 ± 9,9 %MPE respectively. In the 7 days the %MPE were 46,0 ± 7,7; 42,9 ± 7,3 y 80 ± 12,3 for EDCM, EM and EB respectively. The extravasation to 24 hours are not show less that negative control for none extracts and matching to 7 days was obtain moderate decrease with metanolic and butanolic extracts. According to obtained results of different assays (TF, HP y CFA/HP) was butanolic extract that would have greater analgesic activity. Such activity was lesser than matching with reference drug (Ibuprofen) in each assay. Decoloration assay with DPPH was evaluated to determine the antiradical activity of EM and EB obtaining IC50 197 y 30 μg/ml respectivly, it account for a moderate antioxidant activity