Determinación de fármacos de uso veterinario en matrices de origen animal, utilizando como estrategia analítica la extracción por sorción con disco rotatorio y técnicas cromatográficas para su aplicación en estudios de farmacocinética y de depleción de residuos

Abstract

La productividad de la industria pecuaria depende en gran medida del uso de fármacos de uso veterinario, utilizados en el control de enfermedades en animales de producción. En este contexto, la presente investigación demuestra que la extracción por sorción con disco rotatorio (RDSE) es una técnica válida para la etapa de preparación de la muestras de origen animal, como plasma, leche o tejidos, para su utilización en estudios de farmacocinética y estudios de depleción de residuos. Se desarrolló y validó (Según la normativa descrita por la VICH), un total de ocho metodologías analíticas que utilizan RDSE, cinco de ellas con cuantificación mediante HPLC acoplado a un detector espectrofotométrico, una mediante HPLC acoplado a un detector de fluorescencia y dos mediante UHPLC acoplado a espectrometría de masas con un analizador por tiempo de vuelo (TOF). Para el antibiótico florfenicol se desarrolló un método en la matriz plasma de bovino, utilizada para realizar la farmacocinética del producto Duflosan® 30%. Para la determinación florfenicol residual en tejidos de bovinos, la estrategia involucró la hidrolisis ácida a la forma florfenicol-amina y se aplicó a músculo, hígado y riñón de bovinos y se aplicó en el estudio de depleción de residuos para Duflosan® 30%. Para el antiparasitario triclabendazol, se desarrolló un método para cuantificar los metabolitos triclabendazol-sulfóxido y triclabendazol-sulfona presentes en plasma bovino, mediante el método se realizó un estudio de bio-equivalencia para los productos Trisuvet® 10% y Soforen® 10%. Para la determinación de triclabendazol residual en tejidos bovinos, la estrategia involucró la hidrolisis alcalina y oxidación a la forma keto-triclabendazol de los metabolitos de triclabendazol presentes en las matrices a músculo, hígado, riñón y grasa de bovinos, y se aplicó en un estudio de depleción de residuos para el producto inyectable Trisuvet® 10%. En la matriz leche se desarrolló un método para la determinación de simultánea de cuatro antibióticos (oxitetraciclina, sulfadoxina, trimetoprima y enrofloxacino), incluyendo los metabolitos activos 4epi-oxitetraciclina y ciprofloxacino, con HPLC-DAD para la cuantificación y paralelamente se desarrolló un método para la determinación del antiparasitario closantel en leche mediante HPLC con detector de fluorescencia. Para la determinación lincomicina y espectinomicina, se desarrolló un método para su cuantificación en la matriz plasma de cerdo. Para residuos de lincomicina y espectinomicina en tejidos de cerdo se desarrolló una estrategia utilizando la extracción con solvente acelerada (ASE) previa a la etapa de extracción con RDSE, la metodología fue validada en las matrices músculo, hígado, riñón y piel + grasa. Tanto en plasma como tejidos se cuantificó por espectrometría de masas mediante un equipo UHPLC-ESI-TOF