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Caracterización de macrófagos de la cavidad peritoneal y su influencia en el Lupus Eritematoso Sistémico (SLE)

Tesis
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IconCaracterizacion-de-macrofagos-de-la-cavidad.pdf (761.7Kb)
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Acceso abierto
Publication date
2019-08
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Cómo citar
Bono Merino, María Rosa
Cómo citar
Caracterización de macrófagos de la cavidad peritoneal y su influencia en el Lupus Eritematoso Sistémico (SLE)
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Author
  • Valdivieso Berríos, Nicolás Alejandro;
Professor Advisor
  • Bono Merino, María Rosa;
Abstract
El Lupus Eritematoso Sistémico (LES) es una enfermedad autoinmune caracterizada por la hiperactividad de células T y B autorreactivas, la producción de autoanticuerpos y la formación de complejos inmunes que terminan desencadenando daño sistémico. La hiperactividad está mediada por la presentación de antígenos propios, por las células presentadoras de antígenos (APC) como las células dendríticas y los macrófagos. La principal función de los macrófagos es la fagocitosis de patógenos o células apoptóticas y la secreción de citoquinas y quimioquinas que influyen directamente en la respuesta inmune. Anormalidades en la fagocitosis de células apoptóticas por parte de los macrófagos han sido relacionadas con varias enfermedades autoinmunes e inflamatorias, incluyendo el Lupus. En la cavidad peritoneal, las poblaciones más numerosas de células del sistema inmune son los macrófagos y los linfocitos B. Estos últimos producen autoanticuerpos y están relacionados con el desarrollo de enfermedades autoinmunes como el Lupus. En base a estos antecedentes, en este seminario se estudió la interacción entre macrófagos y linfocitos B de la cavidad peritoneal, en ratones enfermos de Lupus y se compararon los resultados con ratones controles sanos. Para esto, analizamos la frecuencia de macrófagos, linfocitos B y linfocitos T de la cavidad peritoneal en el modelo murino de Lupus, NZB/W F1. Mediante análisis de citometría de flujo observamos un aumento significativo en la frecuencia de macrófagos y linfocitos T CD4, y una frecuencia significativamente menor de linfocitos B totales en la cavidad peritoneal de ratones enfermos en comparación con ratones controles. Además, observamos que los macrófagos peritoneales de los ratones enfermos tienen una menor expresión del receptor de manosa CD206 comparado a los ratones controles, dando cuenta de un fenotipo que se alejaría del perfil M2 antiinflamatorio.Por otro parte, la mayor parte de los linfocitos B presentes en el peritoneo de los ratones lúpicos corresponden al fenotipo B1. Con el objetivo de estudiar la interacción entre macrófagos y linfocitos B, realizamos experimentos de cocultivo entre linfocitos B peritoneales de ratones controles y macrófagos peritoneales de ratones controles o lúpicos en presencia de LPS. En estas condiciones se produce la proliferación y diferenciación de los linfocitos B a células preplasmáticas. Nuestros resultados muestran que los macrófagos de ratones lúpicos producen una menor proliferación y diferenciación de los linfocitos B. En conclusión, en este trabajo mostramos que existen alteraciones en la frecuencia, fenotipo y función de los macrófagos presentes en la cavidad peritoneal durante el desarrollo del Lupus. Estas observaciones sugieren que los macrófagos peritoneales tendrían un rol relevante en el desarrollo del Lupus.
 
Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is an autoimmune disease characterized by the hyperactivity of autoreactive T and B cells, the production of autoantibodies and, the formation of immune complexes. Hyperactivity is mediated by the presentation of selfantigens by antigen-presenting cells (APC) such as dendritic cells and macrophages. The primary function of macrophages in the phagocytosis of pathogens or apoptotic cells and the secretion of cytokines and chemokines that directly influence the immune response. Abnormalities in the phagocytosis of apoptotic cells by macrophages have been linked to several autoimmune and inflammatory diseases, including Lupus. In the peritoneal cavity, the most numerous populations of immune system cells are macrophages and B lymphocytes. The latter produces autoantibodies and has been related to autoimmune disease development such as Lupus. Based on this background, in this work was study the interaction between macrophages and B lymphocytes in the peritoneal cavity of diseased mice and compare then with healthy control mice. For this, we analyzed the frequency of macrophages, B lymphocytes, and T lymphocytes in the peritoneal cavity of a murine model of Lupus NZB/W F1. Using Flow cytometry, we observed a significant increase in the frequency of macrophages and CD4 T lymphocytes while B lymphocytes presented a significantly lower frequency in the peritoneal cavity of diseased mice when compared to control mice. Besides, we observed that peritoneal macrophages of diseased mice have a lower expression of the mannose receptor CD206 compare to control, suggesting a phenotype that would move away from the classic M2 anti-inflammatory profile. On the other hand, most of the B lymphocytes present in the peritoneum of lupus mice correspond to the B1 phenotype. In order to study the interaction between macrophage and B lymphocytes, we performed co-culture experiments between peritoneal B lymphocytes of control mice and peritoneal macrophages from control or lupus mice in the presence of LPS. Under these conditions, proliferation and differentiation of B lymphocytes to plasma cells occur. Our results show that macrophages of lupus mice produce less proliferation and differentiation of B lymphocytes. In conclusion, we show that exits alterations in the frequency, phenotype, and function of the macrophages present in the peritoneal cavity during the development of Lupus. These findings suggest that peritoneal macrophages would have an important role in Lupus development.
 
General note
Seminario de Título para optar al Título de Ingeniero en Biotecnología Molecular
Identifier
URI: https://repositorio.uchile.cl/handle/2250/174948
Collections
  • Tesis Pregrado
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