Efecto del protocolo de resucitación hormonal combinado (triyodotironina y metilprednisolona) sobre parámetros de estrés oxidativo y daño hepático en un modelo de hígado perfundido aislado

Abstract

El protocolo de resucitación hormonal combinado (PRH); que puede incluir el uso de corticoides, hormona tiroidea, insulina y vasopresina, se utiliza para prevenir las complicaciones asociadas a la muerte cerebral (MC). La mayoría de los donantes de órganos están en MC, condición que se asocia a cambios hemodinámicos, inflamatorios y hormonales que pueden comprometer la viabilidad de los injertos. El PRH se desarrolló hace tres décadas, con el objetivo de optimizar la función miocárdica y ha sido exitoso en términos de recuperación de donantes e injertos; sin embargo, su efecto en otros órganos ha sido poco estudiado y existe evidencia experimental de que su uso podría resultar deletéreo en el hígado graso sometido a isquemia-reperfusión, aunque no hay evidencia acerca de la respuesta del hígado normal. El trasplante de órganos es un procedimiento complejo que se asocia a daño de los injertos a través de diversos mecanismos, entre los cuales se incluye isquemia tibia, preservación e isquemia fría, y reperfusión en el paciente receptor. El daño que ocurre en la reperfusión se asocia estrechamente al funcionamiento de la célula de Küpffer (CK), capaz de modular la respuesta inflamatoria y oxidativa del órgano a una noxa. El objetivo de ésta tesis fue evaluar el funcionamiento de la CK, así como el daño y el estrés oxidativo en el hígado de animales que recibieron PRH previo a la perfusión en el sistema de hígado aislado. Ratas Sprague Dawley recibieron 0,34 mg/Kg de metilprednisolona (MP) y/o 0,05 mg/Kg triyodotironina (T3). Los hígados obtenidos fueron perfundidos por 45 min en el sistema de hígado perfundido aislado. Se conformaron los siguientes grupos experimentales: a) MP+T3, b) vMP+NaOH, c) MP, d) vMP, e) T3, f) NaOH. Se estudió la respuesta respiratoria de las CK inducida por carbono coloidal, su capacidad fagocítica, parámetros de daño hepático, estrés oxidativo e inflamación. Los resultados muestran que el PRH combinado disminuye los parámetros de daño hepático demostrados por histología y niveles de LDH, mantiene la respuesta respiratoria normal de CK, pero no disminuye estrés oxidativo ni inflamación. Se concluye que el PRH disminuye el daño tisular sin alterar la actividad de CK, y que en las dosis y marco temporal utilizados, se observaron cambios modestos en los marcadores de estrés oxidativo ni inflamación.

The combined hormonal resuscitation protocol (HRP), which may include the use of steroids, thyroid hormone, insulin and vasopressin, is used to prevent complications associated with brain death (BD). The vast majority of organ donors are in BD, a physiopathological condition associated with hemodynamic, inflammatory and hormonal changes, which can jeopardize grafts viability. The HRP was developed three decades ago, with the main aim of optimizing myocardial function. The HRP has been successful in terms of graft and donor recovery, but its effect over other organs, such as kidney and liver, has not been studied. There is experimental evidence suggesting their use may be deleterious in fatty liver subjected to ischemia-reperfusion, although no evidence on the response of normal liver has been published so far. Organ transplantation is a complex procedure, which is associated with graft injury through different mechanisms including warm ischemia, preservation and cold ischemia and reperfusion in the recipient patient. Reperfusion damage is closely dependent on Küpffer cell (CK) function, the liver resident macrophage, capable of modulating the inflammatory and oxidative stress response to the organ to a certain challenge. The aim of this thesis was to evaluate the performance of CK and damage and oxidative stress in the liver of animals receiving HRP prior to perfusion in the isolated liver system. Sprague Dawley rats were given 0.34 mg/Kg of methylprednisolone (MP) and/or 0.05 mg/Kg triiodothyronine (T3). Livers were perfused for 45 min. in the isolated liver system. The experimental groups comprise: a) MP+T3, b) vMP+NaOH, c) MP, d) vMP, e) T3, f) NaOH. CK respiratory burst colloidal carbon-induced and phagocytic capacity was studied. Liver injury, oxidative stress and inflammatory parameters were assessed. Results show combined PRH diminished liver damage, demonstrated by histology and LDH levels, maintains normal CK respiratory burst, but does not reduce oxidative stress or inflammation. In conclusion, PRH maintain CK normal functioning, but have a modest effect over oxidative stress and inflammation parameters.