Rol terapéutico de Células Dendríticas reguladoras en el modelo murino de artritis mediante evaluación histopatológica de articulaciones

Abstract

La artritis reumatoide (AR) es la enfermedad articular inflamatoria más común que afecta al 1% de la población mundial, de causas multifactoriales, poligénica y autoinmune. Se caracteriza por inflamación articular crónica y posterior destrucción del cartílago y hueso provocando deformidad, reducción en la calidad de vida, muerte prematura y elevados costos económicos. La presente investigación estudia durante el curso de la enfermedad los efectos de la utilización como herramienta terapéutica el uso de Células Dendríticas (DCs) estimuladas por cortos periodos con lipopolisacárido (LPS) y cargadas con colágeno bovino tipo II, complementando con inyección intraperitoneal de corticoide ( Dexametasona) entre los días 29 a 34 post-inoculación, utilizando el modelo murino de Artritis Reumatoide inducida con colágeno tipo II (CIA). Logrando obtener su relación con cambios macroscópicos reflejados en los índices Swollen Joint Severity (inflamación articular), Joint Score (número de articulaciones afectadas) obtenidos con medición de pie de metro tres veces por semana e Índice Artrítico (IA), y microscópicos con la medición de puntaje de daño histopatológico a nivel del cartílago articular y fibrosis a nivel de la membrana sinovial en muestras histológicas obtenidas luego del sacrificio de 5 ratones de la cepa DBA1/lacJ (H2q ) en cada uno de los 6 grupos de estudio: CIA, CIA+DEXA, CIA+4hLPS/CII/DCs, CIA+DEXA/4hLPS/DCs, CIA+DEXA/CII/DCs, CIA+DEXA+4hLPS/CII/DCs en los días 47 y 70 post-inoculación CIA para observar los cambios durante el transcurso de la enfermedad. El pre-acondicionamiento con dexametasona de los ratones con CIA establecida fue capaz de interferir con la aparición y progresión de la enfermedad durante un corto periodo. Sin embargo, esta disminución rápida de la inflamación facilitó el despliegue de DCs tolerogénicas pulsadas con antígeno, mostrando una mayor eficacia en el control de progresión de CIA, que la observada en ratones CIA inoculados con DCs tolerogénicas sin acondicionamiento con dexametasona. Esto se ve reflejado en la diferencia estadísticamente significativa en los distintos parámetros estudiados entre el grupo CIA, grupo CIA+4hLPS/CII/DCs y grupo CIA+DEXA+4hLPS/CII/DCs. La histopatología convencional y la histoquímica permitieron observar los cambios a nivel de membrana y cartílago articular en los distintos grupos de estudio, corroborando la severidad de los signos clínicos a través del transcurso y tratamiento CIA. Palabras claves: Artritis reumatoide, CIA, Células dendríticas, Dexametasona.

Rheumatoid Arthritis (RA) is the most common inflammatory joint disease which affects over 1% of the world's population. It is caused by mutlifactorials, polygenic and autoimmune disorders. It is characterized by chronic inflammation and subsequent destruction of the cartilage and bone, causing deformity, reduction in the quality of life, premature death and high economic costs. This research study, during the course of the disease, studied the effects of the use of various therapeutic tools such as the use of dendritic cells (DCs) stimulated by short periods with lipopolysaccharide (LPS) and loaded with bovine collagen type II, complemented by intraperitoneal injection of corticosteroid, in this case Dexamethasone, between 29 to 34 post-inoculations, in which was used a murine model of rheumatoid arthritis induced with collagen type II (CIA), able to obtain its relationship with macroscopic changes reflected in the Swollen Joint Severity Index (joint inflammation) and Joint Score (number of affected joints) obtained with measurement of a caliper everyday and microscopics measured with the Athritic Index, scores of histopathological damage at the level of the joint cartilage and fibrosis at the level of the synovial membrane in histological samples obtained after the sacrifice of 5 mice of the strain DBA1/lacJ (H2q) in each of the 6 study groups: CIA, CIA DEXA, CIA 4hLPS/IIC/DCs, CIA DEXA/ 4hLPS/DCs, CIA DEXA/IIC/DCs, CIA DEXA 4hLPS/IIC/DCs in 47 days and 70 post inoculation CIA to observe the changes during the course of the disease. The corticosteroid preconditioning of mice with established CIA may significantly reduce the inflammatory status, thereby strengthening the regulatory activity of tolerogenic 4hLPS/CII/DCs. The conditioning with Dexamethasone was able to interfere with disease onset and progression during a short period. However, this quenching of the inflammation could have facilitated that antigen-pulsed tolerogenic DCs display a higher effectiveness in controlling CIA progression than that observed when tolerogenic DCs were inoculated without Dexamethasone conditioning. This is reflected in the statistically significant difference in the various parameters studied between the CIA groups, CIA+4hLPS/CII/DCs y CIA+DEXA+4hLPS/CII/DCs. The conventional histology and histochemistry allowed to observe the changes at the membrane and articular cartilage in the different study groups, confirming the severity of clinical signs throughout the course and treatment CIA. Key Words: Rheumatoid arthritis, CIA, Dendritic cells, Dexamethasone.