Cuantificación de subpoblaciones linfocitarias en adultos con neumonía adquirida en la comunidad grave y no grave

Abstract

Antecedentes: La neumonía adquirida en la comunidad (NAC) es una infección aguda respiratoria que perjudica al parénquima pulmonar. Posee un gran impacto mundial afectando principalmente la población geriátrica y pediátrica. En adultos, los agentes más frecuentes son Streptococcus pneumoniae y virus respiratorios. La gravedad de la enfermedad se evalúa con índices pronósticos como el índice de severidad de la neumonía (PSI) o el CURB-65. La evolución de la NAC podría depender de la respuesta inmune (RI) del enfermo, por ello es importante evaluarlo. En estudios preliminares se detectó una disminución de subpoblaciones de linfocitos T y NK en adultos con NAC respecto a adultos sin enfermedad respiratoria y con distinta gravedad mediante citometría de flujo. Para confirmar este resultado es necesario aumentar los casos estudiados además de estudiar la respuesta inmune humoral, cuya disminución podría contribuir al desarrollo de una enfermedad más grave. Hipótesis: Los adultos graves con NAC tienen menor proporción de las subpoblaciones de linfocitos B (CD19 y CD27), T (CD3, CD4 y CD8) y NK (CD16 y CD56) con respecto a los no graves, y esta disminución está dada por características del paciente tales como la edad, el sexo y las comorbilidades. Objetivo: Determinar si las subpoblaciones linfocitarias B, T y NK están disminuidas en adultos graves con NAC respecto a los no graves y establecer su relación con la edad, el sexo y las comorbilidades de los pacientes. Metodología: Los pacientes fueron enrolados en los hospitales Dr. L. Córdova, Clínico de la Universidad de Chile y San José entre julio de 2018 y julio de 2019 y clasificados por gravedad según PSI y CURB-65. A pacientes con agente infeccioso se cuantificaron los recuentos de linfocitos totales (CD45), LT (CD3), LTCD4 (CD4), LTCD8 (CD8), LB vírgenes (CD19) y activados (CD27) y células NK (CD56 y CD16). Resultados: Se estudiaron 22 adultos sin enfermedad respiratoria y 63 adultos con NAC. Ellos mostraron una diferencia en los recuentos celulares con un p<0,05 y una diferencia en el porcentaje de CD19, siendo menor en ambos casos los adultos con NAC. En la comparación referente a la gravedad, no se encontró diferencia entre grave y no grave bajo el criterio de PSI; no obstante, por CURB-65 se encontró una disminución significativa en los porcentajes de linfocitos totales CD45, LTCD3, LTCD4 y LBCD27 de pacientes grave. También se encontró disminuido el porcentaje de LTCD3, LTCD4 y LBCD27 en adultos mayores de 65 años, LTCD4 y LBCD27 en mujeres y linfocitos totales en pacientes que poseen comorbilidades. Conclusiones: Las subpoblaciones linfocitarias están disminuidas en adultos con NAC respecto a adultos sin enfermedad respiratoria. La disminución de LT auxiliares y LB vírgenes favorecerían el desarrollo de una enfermedad grave. La proporción de las subpoblaciones estarían afectadas por la edad, sexo y presencia de comorbilidades. Finalmente, los LBCD19 están disminuidos en pacientes graves (fallecidos e ingresados a UCI) proponiendo su estudio como biomarcador de gravedad de la NAC

Background: Community acquired pneumonia (CAP) is an acute respiratory infection that harm the lung parenchyma. It has a great global impact that mainly affects the geriatric and pediatric population. In adults, the most frequent agents are Streptococcus pneumoniae and respiratory viruses. The severity of the disease is evaluated with prognostic indexes such as the severity index of pneumonia (PSI) or CURB-65. The evolution of the CAP could depend on the immune response of the patient, so it is important to evaluate it. In preliminary studies a decrease in subpopulations of T and NK cells was detected in adults with CAP compared to adults without respiratory disease and with different severity by flow cytometry. To confirm the result, it’s necessary to increase the cases studied in addition to studying the humoral immune response, whose decrease could contribute to the development of a more serious disease. Hypothesis: Severe adults with CAP have lower proportions of B (CD19 and CD27), T (CD3, CD4 and CD8) and NK (CD16 and CD56) lymphocyte subpopulations compared to non-severe adults, and this decrease is given by patient characteristics such as age, sex and comorbidities. Objective: Determine if the lymphocyte subpopulations B, T and NK are decreased in severe adults with CAP compared to non-severe and establish their relationship with the age, sex and comorbidities of the patients. Methodology: The patients were enrolled in “Hospital Dr. L. Córdova”,” Hospital Clínico de la Universidad de Chile” and “Hospital San José” between July 2018 and July 2019 and classified by severity according to PSI and CURB-65. In patients with infectious agent, the total lymphocytes, T cells (TC) (auxiliary and cytotoxic), B cells (BC) (Naive and active) and NK were quantified by flow cytometry with antibodies labeled with anti-CD45, CD3, CD4, CD8, CD19, CD27, CD16 and CD56 fluorochromes respectively. Results: 22 adults without respiratory disease and 63 adults with CAP were studied, they showed a difference in cell counts between all the surface proteins with a p<0.05 and a difference in the percentage of CD19 being lower in the adults with CAP in both cases. In the comparison between severity, no difference was found between severe and non-severe under PSI criteria, however, by CURB-65 a significant decrease was found in percentages of total CD45, TC-CD3, TC-CD4 and BC-CD27 of severe patients. Also was reduced the percentage of TC-CD3, TC-CD4 and BC-CD27 in adults older than 65 years, the TC-CD4 and BC-CD27 in woman and total lymphocytes in patients with comorbidities. Conclusions: Lymphocyte subpopulations are diminished in adults with CAP compared to adults without respiratory disease. The decrease in naive LB and helper LTs would favor the development of a severe disease and the proportion of the subpopulations are affected by age, sex and presence of comorbidities. Finally, the BC-CD19 are diminished in severe patients (deceased and admitted to ICU) proposing their study as a biomarker of severity of the CAP