Genotipificación de Trypanosoma cruzi mediante PCR en tiempo real en sangre y deyecciones de Triatoma infestans alimentados en pacientes con enfermedad de chagas crónica

Abstract

La enfermedad de Chagas (ECh) es una zoonosis vectorial originaria del continente americano, causada por el protozoo parásito Trypanosoma cruzi, y transmitida por numerosas especies de insectos hematófagos de la familia Triatominae. Ya que se trata de un parásito complejo, un aspecto relevante ha sido la identificación de los diversos genotipos de T. cruzi llamados DTU (Discrete Typing Units) que van desde el TcI al TcVI. En Chile los DTUs detctados en pacientes humanos son TcI, TcII, TcV y TcVI entre individuos infectados. Identificar los DTUs ha adquirido importancia clínica, pues diferentes genotipos podrían causar distintas patologías, circular en diferentes localidades y ciclos de transmisión y presentar diferente sensibilidad a fármacos tripanocidas. En esta tesis, se amplificaron mediante qPCR los DTUs de T. cruzi circulantes en sangre periférica y en Xenodiagnóstico (XD), una técnica que utilizó Triatoma infestans para amplificar el parásito de 14 pacientes crónicos con ECh de las Provincias de Choapa y Limarí, Región de Coquimbo, Chile. Como resultado fue posible determinar que el XD presentó mayor cantidad de casos positivos en comparación a la muestra de sangre periférica. En el total de los casos se detectó 64,28% infección simple y 35,72% mixtas, más diferencias estadísticamente significativas en la frecuencia del DTU TcV. Al utilizar XD se pudo detectar como T. infestans amplifica tiene afinidad un DTU que por sobre otros, probablemente debido a un proceso de co-evolución.

Chagas disease (ECh) is a vecto- borne zoonosis native to the Americas caused by the parasitic protozoan Trypanosoma cruzi, and numerous species of hematophagous insects of the Triatominae family. As a complex parasite, a relevant aspect is the identification of the various genotypes of T. cruzi called DTU (Discrete Typing Units) ranging from TcI to TcVI. In Chile, the DTU identified in infected human patients are TcI, TcII, TcV, and TcVI. Identifying DTUs has gained clinical importance since different genotypes could cause different pathologies, circulate in different locations and transmission cycles and present different sensitivity to trypanocidal drugs. In this thesis, the circulating T. cruzi DTUs in peripheral blood were amplified by qPCR and in Xenodiagnostic (XD), a technique that used Triatoma infestans to amplify the parasite of 14 chronic patients with ECh from the provinces of Choapa and Limarí, Region of Coquimbo, Chile. As a result, it was possible to determine that the XD presented a greater number of positive cases compared to the peripheral blood sample. In the total of cases, 64.28% simple and 35.72% mixed infections were detected, plus statistically significant differences in the frequency of TcV DTU. When using XD, it could be detected that T. infestans have an affinity for one DTU over others, probably due to a co-evolution process.