Participación de la cisteína desulfurasas de Escherichia coli en la resistencia a telurito de potasio

Abstract

La falta de similitud entre los diferentes determinantes de resistencia a telurito de potasio analizados a la fecha ha dificultado la postulación de un mecanismo de resistencia a este tóxico. La idea más actualizada es que ésta sería multifuncional y que diferentes rutas metabólicas podrían contribuir al mecanismo de resistencia. Resultados recientes del laboratorio han sugerido la participación del gen iscS de Geobacillus stearothermopfiilus V en la resistencia de Escherichia coli a K2TeO3. Dado que una mutante de E. coli K12 con una inserción en el gen iscS crece, el objetivo de esta Tesis fue identificar cual de las otras dos cisteína desulfurasas presentes en esta bacteria, CSD y CsdB, puede(n) reemplazar al producto del gen r.scS en el fenómeno. Así, se construyó mutantes de E- coll en los genes de las desulfurasas CSD, CsdB e lscS y se clonó sus genes estructurales en un vector de expresión. Se determinó la resistencia a KzTeOg de las cepas mutadas y complementadas con los genes recombinantes. Los resultados obten¡dos sugieren fuertemente que CsdB es la proteína que está involucrada, además de lscS, en la resistencia basal de E. coli a K2TeO3. CsdB es a su vez capaz de complementar defectos en la síntesis de ácido nicotínico en cepas lscS y csdB-.

No universal bacterial potassium tellurite res¡stance mechan¡sm has been proposed to date and ¡t seems to involve diverse biochemical mechanisms. Work previously carried out in our laboratory has shown that the product of the rscS gene from Geobacillus stearothermophilus Y, a cysteine desulfurase, confers tellurite resistance in Escherichia coli K-12. Mutants in rscS are hypersensitive to tellurite and grow poorly even in rich media. Since E coli has three cysteine desulfurases, lscS, CsdB and CSD, we examined the sens¡tiv¡ty to tellurite in E. coli mutant cells in these three genes and in strains which were complemented with the homologous and/or paralog genes. lt was found that the expression of the csdB gene mediates basal tellurite resistance in E. coli and therefore behaves as an alternative pathway to lscS. CsdB complements also the auxotrophic requeriments of iscS and csdB- E coli for nicotinic acid.