Regulación embriónica reconocida por microscopía de barrido en embriones desagregados y agregados

Abstract

Blastómeros aislados de embriones de 8 y 16 cèlulas muestran una superficie lisa en el contacto con otros blastömeros y una superficie libre microvellosa. Las microvellosidades reaparecen completamente sobre la superficie libre del 52 % de los 1/8 de embrion У parcialmente sobre el 88 % de los 1/16 de embrion si son cultivados in vitro por 6 h. Cuando embriones de 2 a 8 cèlulas son agregados a embriones de 8 cèlulas y separados después de 1-3 h, la superficie de contacto de los embriones de 8 cèlulas se vuelve lisa. Embriones fijados de 8 cèlulas son tambièn capaces de inducir la desaparición de microvellosidades sobre la superficie de contacto de embriones de 8 cèlulas. Agregados de mórulas avanzadas no muestran desaparición completa de microvellosidades en sus superficies de contacto si no màs bien un aflojamiento de sus blastómeros perifèricos.

Nuestros resultados muestran quе 1/8 y 1/16 tienden a recuperarse de la regionalización, que el proceso de agregación de embriones con 8 cèlulas o menos es similar a la compactaciòn y que embriones con màs de 8 cèlulas parecen agregarse por reordenamiento celular. Mostramos que la regionalización de blastómeros, que depende del contacto cèlula-cèlula puede ser la base espacial de la regulaciðn embriónica y de la diferenciación normal adentro-afuera de embriones tempranos de ratón.

Blastomeres isolated from 8- and 16-cell embryos show a smooth surface at their contact with other blastomeres and a microvillous free surface. Microvilli reappear completely on the smooth surface of 52 % of 1/8 embryos and partially on 88% of 1/16 embryos if cultured in vitro for 6 h. When 2- to 8-cell embryos are aggregated to 8-cell embryos and forced apart after 1-3 h, the contact surface of the 8-cel1 embryos has become smooth. Fixed 8-cell embryos are also able to induce complete disappearance of microvilli on the contact surface of a living 8-cel1 embryo. Embryos having more than 8 cells do not induce complete disappearance of microvilli on the contact surface of 8-cell embryos. Aggregates of late morulae do not show complete disappearance of microvilli at their contact surfaces but rather a loosening of their peripheral blastomeres. Our results show that isolated 1/8 and 1/16 embryos tend to recover from regionalization, that the process of aggregation of embryos having 8 cells or less is similar to compaction and that embryos having more than 8 cells seem to aggregate by cell sorting. We submit that blastomere regionalization, which depends on cel1-cel1 contact, may be the spatial basis of embryonic regulation and of the insideoutside normal differentiation of early mouse embryos.