Desarrollo de un sistema recombinante del virus de la estomatitis vesicular que codifique la secuencia de la glicoproteína spike de la variante Delta del virus SARS-CoV-2

Abstract

El SARS-CoV-2 (Severe Acute Respiratory Syndrome coronavirus-2) es un nuevo tipo de coronavirus, que ha sido el principal problema de salud pública a nivel mundial durante la pandemia de los últimos dos años. Desde la detección de este virus en diciembre del año 2019, se ha reportado a nivel mundial el surgimiento de distintas variantes, siendo una de las principales variantes de preocupación del año 2021 la variante Delta. Esta variante se caracteriza por una potente evasión de la respuesta inmune generada tanto por infección como por vacunación y, por lo tanto, fue una de las principales causantes de contagios y muertes a nivel mundial y nacional. La necesidad de estudiar esta y otras variantes en laboratorios con medidas de seguridad más accesibles para la comunidad científica mundial condujo a la producción de nuevos sistemas virales que permitan realizar estos estudios. Uno de estos consiste en el virus de la estomatitis vesicular (VSV) recombinante, que está decorado por la proteína S del virus original SARS-CoV-2-Wuhan-Hu-1. El propósito general de esta memoria consistió en modificar este virus de forma que exprese específicamente la proteína S de la variante Delta del virus SARS-CoV-2. Ello se consiguió subclonando la región codificante de la proteína S de la variante Delta al antigenoma de VSV y rescatando virus recombinante desde células transfectadas. Mediante microscopía de fluorescencia y citometría de flujo se pudo corroborar la replicación viral y la expresión de la proteína S. Este sistema basado en un virus recombinante podrá ser usado como una herramienta eficiente para estudios de neutralización de anticuerpos contra la proteína S de la variante Delta del virus SARS-CoV-2, tanto en muestras de individuos vacunados como personas y animales infectados. Además, se sentaron las bases para que esta herramienta puede ser modificada en un futuro para evaluar otras variantes que puedan surgir del virus SARS-CoV-2

SARS-CoV-2 (Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus-2) is a new type of coronavirus, which has been the main public health problem worldwide during the pandemic of the last two years. Since the detection of this virus in December 2019, the emergence of different variants has been reported worldwide, and one of the main variants of concern in 2021 was the Delta variant. This variant is characterized by a powerful evasion of the immune response both by infection and by vaccination and, therefore, was one of the main causes of infections and deaths worldwide and nationally. The need to study this and other variants in laboratories with security measures more accessible to the world scientific community led to the production of new viral systems that would allow these studies to be carried out. One of these systems is the recombinant vesicular stomatitis virus (VSV), which is decorated by the S protein of the original SARS-CoV-2-Wuhan-Hu-1 virus. The general purpose of this memory was too modify this virus so that it specifically expresses the S protein of the Delta variant of the SARS-CoV-2 virus. This was achieved by subcloning the Delta variant S coding region into the VSV antigenome and rescuing recombinant virus from transfected cells. Through fluorescence microscopy and flow cytometry, viral replication and protein S expression could be confirmed. This system based on a recombinant virus could be used as an efficient tool for useful neutralization studies against protein S of the Delta variant with samples from vaccinated or infected individuals as well as animals. In addition, the foundations were laid so that this tool can be modified in the future to evaluate other variants that may arise from the SARS-CoV-2 virus