Rol de la proteína viral BamHI-A rightward frame 1 de virus Epstein-Barr en la oncogénesis del cáncer de pulmón de células no pequeñas

Abstract

El cáncer de pulmón es la primera causa de muerte asociada a cáncer en el mundo. El cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) representa el 85% de los casos, comprendiendo diversos subtipos, tales como el adenocarcinoma (AdC) y carcinoma de células escamosas (SQC). Se ha reportado la presencia del virus Epstein-Barr (EBV) en NSCLCs, el cual es un herpesvirus con un rol en el desarrollo de carcinoma nasofaríngeo, cáncer gástrico y linfomas. Esto se debe a la capacidad del virus de permanecer en estado de latencia en esos tipos celulares. Además, el EBV puede establecer un ciclo lítico abortivo (CLA), en el cual el virus expresa ciertas proteínas pertenecientes a su ciclo lítico que pueden ejercer funciones oncogénicas. BamHI-A rightward frame 1 (BARF1) es una proteína lítica temprana que promueve progresión del ciclo celular, inhibición de apoptosis, evasión de la respuesta inmune e inmortalización celular. Esta proteína se ha encontrado expresada en carcinomas asociados a la infección por EBV. En esta tesis se plantea que BARF1 promueve cambios fenotípicos y propiedades tumorales de células epiteliales pulmonares. El objetivo es caracterizar los cambios fenotípicos promovidos por BARF1 en células de pulmón normales y tumorales. Se usaron las líneas celulares pulmonares A549 y BEAS-2B, las cuales fueron transfectadas establemente con un constructo codificante para BARF1. Se evaluó proliferación, migración e invasión celular y transición epitelial mesenquimal (TEM). Finalmente, se analizó la presencia de EBV en NSCLCs de pacientes chilenos y transcritos de BARF1. Se encontró que la expresión de BARF1 correlaciona con una mayor proliferación, capacidad migratoria e invasiva de células de pulmón. Finalmente, esta tesis confirma la presencia de EBV y BARF1 en algunos casos de NSCLCs de pacientes chilenos. Se concluye que EBV y BARF1 podrían estar involucrados en el desarrollo de ciertos casos de cáncer pulmonar. Se necesitan estudios adicionales para confirmar estos hallazgos.

Lung cancer is the first cause of cancer-related deaths worldwide. Non-small cell lung cancer represents 85% of all lung cancer diagnosed worldwide, including a plethora of subtypes of cancer, namely adenocarcinoma and squamous cell carcinoma, among many others. Lately, several studies have confirmed the presence of Epstein-Barr virus in NSCLC cases. EBV is a herpesvirus associated with the development of many types of cancer in the human body, such as nasopharyngeal and gastric carcinoma and lymphomas. This have been related to the EBV capacity of developing a persistent infection and the establishment of a latency state in the human cells. In the context of a viral latency, it has been proved that EBV can undergo an abortive-lytic cycle, where the EBV expresses lytic cycle proteins but does not achieve cellular lysis. Among these lytic proteins, arises BamHI-A rightward frame 1 (BARF1), an early lytic protein with many notable properties, such as cell cycle promotion, apoptosis inhibition, cellular immortalization, and immune evasion. This protein has been exclusively found in EBV-related carcinomas. The hypothesis of this work establishes BARF1 as a protein that can promote phenotypical changes and oncogenesis in epithelial lung cells. The main goal of this work is to characterize those phenotypical changes in vitro, using healthy and cancerous lung cell models. Thereby, we transfected A549 and BEAS-2B cell lines to make them express BARF1 consistently, to study changes in cellular proliferation, migration and invasion, along with epithelial-mesenchymal transition. Finally, we studied the presence of EBV in Chilean NSCLC cases and their expression of BARF1. In this work we found that BARF1 expression correlated with increased cell proliferation, migration and invasion in vitro. Finally, we confirmed the presence of EBV and transcripts of BARF1 in Chilean NSCLC cases.