Implementación y validación de un método de análisis de metilmercurio para muestras hidrobiológicas siguiendo los principios de la química verde

Abstract

Este estudio presenta la implementación y validación de un método analítico para determinar metilmercurio (MeHg) en matrices hidrobiológicas, enfocándose en muestras de salmón, a través de cromatografía gaseosa con detector de captura de electrones (GC-ECD). El objetivo principal fue diseñar una metodología más rápida y práctica, que reduzca el uso de solventes y minimice el impacto ambiental en comparación con el método oficial recomendado por la entidad fiscalizadora. La propuesta metodológica se basó en la guía de validación del Instituto de Salud Pública (ISP) y se alineó con los principios de la química verde, priorizando la eliminación de reactivos nocivos. El proceso de validación incluyó parámetros críticos como selectividad, linealidad, sensibilidad, límites de detección y cuantificación, precisión (repetibilidad y reproducibilidad), veracidad (sesgo y recuperación) y robustez. La selectividad y especificidad se confirmaron al comparar cromatogramas de muestras fortificadas con estándares puros, lo que evidenció la capacidad del método para identificar el analito sin interferencias significativas. La linealidad se validó mediante curvas de calibración en matriz, con un coeficiente de determinación superior a 0,99, confirmando la relación proporcional entre concentración y respuesta instrumental. Los límites de detección (LD) y cuantificación (LC) se calcularon experimentalmente, pero para garantizar la confiabilidad en muestras reales, se adoptaron límites operativos más estrictos: 18 μg/L (LD) y 60 μg/L (LC). La precisión se evaluó mediante estudios de repetibilidad y reproducibilidad, utilizando como criterios de aceptación el coeficiente de variación de Horwitz. La veracidad se evaluó mediante el sesgo (utilizando material de referencia certificado DOLT-5) y la recuperación. El análisis de sesgo mostró una concordancia entre los valores obtenidos y los esperados, sin encontrar diferencia estadísticamente significativa según criterio t-student, mientras que la recuperación, evaluada en muestras fortificadas a 400 y 800 μg/L, presentó porcentajes que 2 oscilaron entre 98.8% y 101.1%, dentro del rango aceptable (80–120%) establecido por la AOAC. La robustez se verificó al modificar parámetros clave como la cantidad de sulfato de magnesio, la concentración de solución salina, el tiempo de centrifugación y el flujo de gas portador. Los resultados indicaron una estabilidad metodológica frente a estas variaciones, validando así su adaptabilidad. El método propuesto se destaca por su sostenibilidad ambiental: eliminó el uso de tolueno, un compuesto orgánico volátil (COV) con un mayor potencial de formación de ozono troposférico a comparación al acetonitrilo y redujo el volumen de solventes en comparación con el método AOAC 988.11. Además, al operar a temperatura ambiente, disminuyó el consumo energético y optimizó los costos operativos. En conclusión, el método validado se presenta como una alternativa precisa, robusta y ecológicamente responsable para la cuantificación de metilmercurio en matrices hidrobiológicas, asegurando el cumplimiento normativo y contribuyendo a la inocuidad alimentaria global.