Guía metodológica para la producción de micelios de champiñón ostra (Pleurotus ostreatus)

Abstract

La memoria establece como objetivo la elaboración de una metodología de producción de micelio de champiñón ostra (P. ostreatus) a pequeña escala en el laboratorio de Biodeterioro y Preservación de la Facultad de Ciencias Forestales y de la Conservación de la Naturaleza de la Universidad de Chile. A partir de esto se creó una guía de producción de micelio a través de un análisis y estudio bibliométrico, el levantamiento de ensayos para comparar diversos métodos de cultivos con los obtenidos del análisis y mediante un piloto de producción de micelio, sujeto a las capacidades del laboratorio. Del análisis bibliográfico se replicaron los métodos a utilizar en el montaje de ensayos y durante el piloto de producción de micelio, tales como la utilización de los métodos de inoculación bajo la campana de flujo laminar, esterilización en autoclave e incubación en la cámara de cultivo. Todo lo anterior a partir de dos cepas de Pleurotus ostreatus, una obtenida a partir de la clonación de tejido interno de carpóforos obtenidos en el mercado y otra cepa obtenida a través de la compra de micelio en grano del laboratorio de una empresa privada. Ambas de la variedad de gris de Champiñon ostra (Pleurotus ostreatus). Del análisis bibliométrico los principales sustratos hallados con mayor eficiencia biológica (EB) fueron; Pulpa de café 5 días fermentada (160%), Fibra de coco con pulpa de café (152%), Hojas de maíz (131%), Paja y harina (113%), Cascarilla de cacahuate (100%). De estos se rescata uno de los sustratos más utilizados y también accesibles en Chile que es la paja de trigo (46.1% EB), con este, se montaron ensayos en los que se comparó la EB según dos cepas y según la proporción y origen del inoculo (granos de trigo y avena). Los resultados mostraron que en promedio para la cepa P-75 Ostra gris se logró un 70% promedio de EB la cual también fue la más rápida en colonizar al sustrato y también en fructificar. Por otra parte, para la cepa obtenida con el proceso realizado en el laboratorio del cultivo de tejido a partir de carpóforos obtenidos comercialmente se obtuvo un EB de 61% en promedio. Este último incluyo la mayor Eficiencia biológica, de un 89% obtenida con el Tratamiento 4, que contempla 1450 g. de paja húmeda (415 g peso seco) y 100 g. de micelio en avena. Paralelamente, se levantaron ensayos descriptivos de otros dos tipos de sustratos; restos de poda de vid, alfalfa, y mezclados con trigo en proporciones 50/50 para cada uno de ellos. Mostrándose una rápida colonización en aquellos que contenían restos de poda de vid, y una facilidad de contaminación en aquellos que contenían alfalfa, por lo que se decidió desecharlos. Los resultados en términos de eficiencia biológica al cabo de 30 días de incubación en una cámara de cultivo a 25° C fueron favorables para aquellos sustratos que contenían restos de poda de vid mezclados con paja de trigo con 51% de EB. Los resultados de la memoria permitieron evidenciar que la mayor parte de los estudios describen el uso de autoclave para la esterilización del sustrato, al igual como se hizo para el levantamiento de estos ensayos, esencialmente para la preparación del inoculo. Sin embargo, existen diferentes métodos que se acomodan a las necesidades de cada productor cuando se trata del cultivo de hongos a un nivel mayor, siendo la pasteurización por vapor la que otorga mayor calidad de sustrato, pero requiere de un mayor tiempo de ejecución. Otras más rápidas, sacrifican calidad del sustrato para ganar tiempo y facilidad en la aplicación de la técnica como lo es el tratamiento con agua caliente. Con la cosecha de los ensayos se evidenció la calidad de los micelios producidos de champiñón ostra (inóculo) en el laboratorio de Biodeterioro y preservación, el grano más accesible fue el de avena y también fue aquel que presentaba un mayor volumen con un menor peso. El ensayo y error a la hora de definir el método de producción permitió ajustar los cuidados necesarios para cada proceso, permitiendo establecer la metodología en una guía de producción de micelio basado en Pleurotus ostreatus.

The study establishes as its objective the elaboration of a methodology for production of oyster mushroom mycelium (P. ostreatus) in the Biodeterioration and Preservation laboratory of the Faculty of Forest Sciences and Nature Conservation of the University of Chile. From this, the elaboration of a mycelium production guide was achieved through a bibliographic compilation and a bibliometric study, in addition to the collection of tests that allowed the comparison of various cultivation methods and contrasting the results with those obtained from the analysis. A pilot of the production of mycelium subject to the capabilities of the Biodeterioration and Preservation Laboratory of the Faculty of Forest Sciences and Nature Conservation of the University of Chile. From the bibliographic analysis, the methods to be used in the assembly of tests and during the mycelium production pilot were replicated, such as the use of the methods of inoculation under the laminar flow hood, autoclave sterilization and incubation in the culture chamber. All the above from two strains of Pleurotus ostreatus, one obtained from the cloning of internal tissue of carpophores obtained on the market. And another obtained through the purchase of grain mycelium from the laboratory of a private company. Both gray oyster mushroom variety. From the bibliometric analysis, the main substrates found with a higher biological efficiency (BE) were 5-day fermented coffee pulp (160%), Coconut fiber with coffee pulp (152%), Corn husks (131%), Straw and flour (113%), Peanut shells (100%). Of these, one of the most used substrates is rescued and accessible in Chile, which is wheat straw (46.1% EB), with this, trials were set up in which the biological efficiency was compared according to two strains and according to the proportion and origin. of the inoculum (wheat grains and oats). The results showed that on average for the P-75 Gray Oyster strain it achieved an average 70% EB which was also the fastest to colonize the substrate and to bear fruit, on the other hand, for the strain obtained with the process carried out in the laboratory of tissue culture from carpophores obtained commercially, an average of 61% EB was obtained. However, the latter included the highest biological efficiency with 89% obtained with Treatment 4, which includes 1450 g. of wet straw (415 g dry weight) and 100 g. of mycelium in oats. Descriptive essays of two other types of substrates were also carried out; vine pruning remains, alfalfa, and mixed with wheat in proportions 50/50 for each of them. Showing a rapid colonization in those that contained vine pruning remains, and an ease of contamination in those that contained alfalfa and that it was finally decided to discard them. The results in terms of biological efficiency after 30 days of incubation in a culture chamber at 25°C were favorable for those substrates that contained vine pruning debris mixed with wheat straw with 51% GE. The results of the report made it possible to show that most of the studies describe the use of an autoclave for the sterilization of the substrate, as was done for the lifting of these tests, essentially for the preparation of the inoculum. However, there are different methods that accommodate the needs of each producer when it comes to mushroom cultivation at a higher level, steam pasteurization being the one that provides the highest quality substrate but requires a longer execution time. Other faster ones sacrifice quality of the substrate to gain time and ease in the application of the technique, such as the treatment with hot water. With the harvest of the trials, the quality of the mycelia produced from the oyster mushroom (inoculum) in the Biodeterioration, and preservation laboratory was evidenced, the most accessible grain was that of oats and it was also the one that presented a greater volume with a lower weight. The trial and error when defining the production method allowed to adjust the necessary care for each process, allowing to establish the methodology in a mycelium production guide based on Pleurotus ostreatus.