Caracterización del microbioma subgingival de sitios con y sin sangrado al sondaje en pacientes con periodontitis crónica

Abstract

La periodontitis es una enfermedad originada por cambios a nivel del microbioma subgingival y su interacción con la respuesta inmunoinflamatoria del hospedero, produciéndose como resultado la destrucción progresiva de los tejidos de soporte del diente. Por tanto, durante este proceso la inflamación juega un rol esencial, por lo cual nuestro objetivo fue evaluar la influencia de la inflamación, evidenciada a través del signo clínico “Sangrado al Sondaje” (BOP) en la composición y cantidad del microbioma subgingival en sitios con periodontitis. Se tomaron dos muestras de placa bacteriana subgingival por sujeto estudiado (n=15), con y sin presencia BOP, con igual “Profundidad al Sondaje”, que fue fijada previamente en 5 mm. Para la caracterización del microbioma se utilizó piro-secuenciación 454 de los amplicones generados por PCR para las regiones V1-V2 del gen 16S rRNA y PCR en tiempo real. En cuanto a la composición de estas comunidades microbianas, se obtuvieron 109.860 secuencias de  180 bp de longitud y se alcanzó una cobertura de alrededor del 98% en todas las muestras. No hubo diferencias en la diversidad de las comunidades con y sin sangrado, sin embargo la abundancia de las especies provenientes de las muestras sin sangrado se distribuyeron de manera más homogénea que las con sangrado. Respecto a la riqueza encontrada, identificamos 1.257 OTUs (Unidades Operacionales Taxonómicas) definidas al 97% de similitud. Dentro de las OTUs más abundantes diferencialmente representadas entre ambas condiciones, encontramos a Enterobacter sakazakii OT - 75 y Neisseria subflava OT - 476 en sitios con sangrado. Una especie aún no cultivada de Treponemas (OT - 237) y Parvimonas micra OT - 111 están aumentadas en los sitios sin sangrado. Además, se encontró una gran cantidad de diferencias en OTUs de menor abundancia. A nivel de género éstas diferencias sólo se reflejaron en 8 de un total de 94 géneros bacterianos encontrados. El phylum Proteobacteria, se encuentra aumentado en el microbioma de sitios con BOP, al igual que la carga bacteriana total. Como conclusión, establecemos que la presencia de inflamación favorece el aumento bacterias presentes en el microbioma subgingival y aparentemente podría estar vinculada sólo con diferencias menores a nivel de la composición microbiana.