Efecto dosis-respuesta de boldina sobre viabilidad y toxicidad celular en macrófagos humanos

Abstract

Introducción: Dentro de las enfermedades inflamatorias que afectan a los tejidos periodontales, encontramos aquellas que afectan al periodonto marginal (gingivitis, periodontitis) y al periodonto apical (periodontitis apicales). Los macrófagos corresponden a células clave en la regulación de la inflamación, respuesta inmune, homeostasis ósea y remodelación tisular en la respuesta inmune innata periapical y periodontal. El boldo es un árbol chileno, cuyas hojas han sido empleadas tradicionalmente para tratamiento de desórdenes digestivos y biliares. La boldina es uno de los alcaloides del boldo más ampliamente estudiados, por sus propiedades antiinflamatorias, antipiréticas, antitumorales, citoprotectoras, entre otras. En la literatura se han reportado distintos efectos de boldina sobre diferentes líneas celulares, sin embargo, se desconoce su efecto en la viabilidad celular y concentraciones de uso no tóxicas sobre macrófagos humanos. Objetivo: Determinar el efecto de la concentración de boldina sobre la viabilidad y citotoxicidad en macrófagos humanos. Metodología: La boldina fue previamente aislada de la corteza de Peumus boldus Molina, de acuerdo con reportes previos. Células monocíticas humanas de la línea THP-1 fueron diferenciadas a macrófagos mediante la estimulación con forbol 12- miristato 13-acetato (PMA) 10 nM y estimulados en presencia o ausencia de boldina en distintas concentraciones (0 -1000 µg/ml). Los macrófagos previamente diferenciados fueron estimulados en ausencia o presencia de distintas concentraciones de boldina (0 µg/ml - 250 µg/ml). Se evaluó la morfología y viabilidad celular mediante microscopía óptica, y citotoxicidad mediante ensayo MTT. El análisis estadístico se realizó a través del paquete estadístico STATA 12 ®. Se consideró significancia estadística si p<0,05. Resultados: Boldina en sus concentraciones más elevadas (≥200 µg/ml) mostró cambios morfológicos, efecto citotóxico y reducción de la viabilidad en comparación con el grupo control en macrófagos humanos. Por otro lado, las concentraciones entre 50 µg/ml y 150 µg/ml de boldina no afectaron la morfología, 9 viabilidad ni generaron citotoxicidad. Conclusiones: En este trabajo de investigación se establecieron las concentraciones tóxicas y concentraciones viables de boldina en macrófagos, mediante análisis de morfología celular, viabilidad celular y citotoxicidad. Se determinó que la exposición a boldina en concentraciones sobre los 200 µg/ml generan toxicidad creciente en macrófagos humanos. El uso de boldina en concentraciones iguales o menores a 100 µg/ml son seguras y no generan cambios sobre la morfología y viabilidad de macrófagos humanos.