Efecto de la taquicardia eléctrica sobre la fosforilación de proteínas del retículo sarcoplasmático de corazón de perro
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2008Metadata
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Donoso Laurent, Paulina
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Efecto de la taquicardia eléctrica sobre la fosforilación de proteínas del retículo sarcoplasmático de corazón de perro
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Abstract
El RS es el compartimiento intracelular responsable de la regulación del Ca+2 en las células
cardíacas de los mamíferos. En él se ubican las proteínas RyR2, SERCA2a y PLB,
responsables de la regulación de la salida y entrada de Ca+2 desde este compartimiento, lo
que posibilita la contracción y la relajación del músculo cardíaco. Estas proteínas se regulan
mediante fosforilación y desfosforilación de algunos de sus aminoácidos, entre los que se
encuentran la Ser2809 y la Ser2815 en el RyR2; la Ser38 en la SERCA 2a y la Ser16 y la Thr17
en el PLB. Se ha desarrollado un modelo de precondicionamiento por taquicardia eléctrica
que disminuye el tamaño del infarto producido por una isquemia prolongada. La
taquicardia eléctrica aumenta la actividad de las proteínas responsables de la regulación del
Ca+2. Aunque las bases moleculares de este aumento de actividad no se conocen, estos
pueden deberse a cambios en su fosforilación. Hasta el momento, la fosforilación de los
aminoácidos mencionados solo puede detectarse con anticuerpos específicos. En este
trabajo se evaluó un método de tinción para proteínas fosforiladas y proteínas totales, el
cual permitiría conocer la fosforilación de las proteínas en estudio, sin la necesidad de saber
específicamente cuales son todos los sitios de fosforilación de cada una de ellas. Los
resultados se compararon con los obtenidos mediante la técnica de Western blot con
anticuerpos comerciales para los sitios de fosforilación conocidos.
Encontramos que la tinción para proteínas fosforiladas y proteínas totales no tiene la
sensibilidad necesaria como para determinar cambios entre las condiciones basales y de
taquicardia.
La detección de fosforilación en Western blots con los anticuerpos comerciales disponibles,
demostraron un aumento de la fosforilación del RyR2 en la Ser2809, así como también en el
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PLB en la Thr17, lo que sugiere que el modelo de precondicionamiento cardíaco, mediado
por taquicardia eléctrica, aumentaría tanto la velocidad de liberación Ca+2 desde el retículo
sarcoplasmático a través de los RyR2, como de su recaptación mediante la acción de la
SERCA2a
General note
Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario
Identifier
URI: https://repositorio.uchile.cl/handle/2250/130901
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