Evaluación de la prueba de aglutinación rápida en placa con 2 mercaptoetanol para el diagnóstico de Brucella canis

Abstract

La brucelosis canina constituye un problema para la salud animal y humana, que cobra especial relevancia en los criaderos caninos, debido a sus mecanismos de transmisión, alto potencial de diseminación en estos y a los efectos perjudiciales que causa en la fertilidad de los animales afectados. El diagnóstico definitivo es el diagnóstico directo mediante cultivo, pero por inconvenientes prácticos y costos asociados es poco factible de aplicar en criaderos que busquen diagnosticar a todos sus animales. Surge entonces la serología como alternativa de diagnóstico indirecto. Dentro de estas técnicas, la denominada prueba de aglutinación rápida en placa con 2-mercaptoetanol (2ME-RSAT), se consideró como una atractiva alternativa de “screening” para el diagnóstico de Brucella canis en Chile. Esto dada su rapidez en la obtención de resultados, facilidad de implementación y bajo costo La presente memoria de título implementó la prueba de 2ME-RSAT, ya utilizada en otros países, en el laboratorio de bacteriología de la Facultad de Ciencias Veterinarias y Pecuarias de la Universidad de Chile (LaBFAVET). Estableciéndose que presentó una sensibilidad de 100% y una especificidad de 74,3%, utilizando la prueba de contrainmunoelectroforesis (CIEF) como técnica de referencia. Se trabajó con 23 sueros controles positivos de perras experimentalmente infectadas y 39 sueros controles negativos provenientes de perros negativos por CIEF y sin sospecha clínica de Brucella canis. El antígeno utilizado fue una suspensión de células inactivadas de B. canis. Se calcularon además las concordancias del 2ME-RSAT con las pruebas de CIEF y ELISA indirecto, actualmente realizadas en la Facultad de Ciencias Veterinarias y Pecuarias (FAVET) de la Universidad de Chile. La sensibilidad y especificidad obtenidas permiten suponer la utilidad del 2ME-RSAT como “screening” diagnóstico. Pero la concordancia moderada con CIEF (k = 0.489) y baja con ELISA (k = 0.143), ponen en duda dicha utilidad

Canine brucellosis is a disease that signifies a problem for animal and human health, but has especial significance for breeding kennels, where its transmission mechanisms and high potential for dissemination are important factors, as well as the negative consequences it causes in affected animals. Direct diagnostic through bacteriological culture is the gold standard but due to practical problems and associated costs, it is not a feasible alternative for breeding kennels that seek to test all their animals. Indirect diagnostics through serology is therefore a plausible option. Due to its potential for obtaining results in a short time frame, its simple implementation and low cost, the rapid slide agglutination test with 2-Mercaptoethanol (2ME-RSAT) was considered an attractive alternative for the screening diagnostic of Brucella canis. This thesis implemented the 2ME-RSAT test, already used in other countries, in the Laboratory of Bacteriology at de Faculty of Veterinary Sciences of the University of Chile. Determining a sensitivity of 100% and specificity of 74,3%, with counter-immuno-electrophoresis (CIEP) as the referential technique. The materials employed were: 23 positive control serums obtained from experimentally infected bitches, 39 negative control serums from dogs negative by CIEP and without clinical signs of canine brucellosis. The antigen used was a suspension of inactivated B. canis cells. The agreement with CIEP and indirect ELISA techniques, both performed at the University of Chile Veterinary Diagnostics Laboratories, was also calculated. The sensitivity and specificity levels obtained suggest the plausibility of employing 2ME-RSAT as a diagnostic screening test. However the agreement results, moderate for CIEP (k = 0.489) and low for ELISA (k = 0.143), cast doubts on its usefulness. Various factors could explain this contradiction and are detailed in the discussion