Rol de miR-515-5p en la susceptibilidad a la infección con Trypanosoma cruzi en explantes de placenta humana.

Abstract

La enfermedad de Chagas es causada por el protozoo parásito zoonótico Trypanosoma cruzi. La transmisión congénita de T. cruzi es epidemiológicamente relevante, aunque se reportan bajas prevalencias. Previamente se ha demostrado que el recambio epitelial del trofoblasto es parte de la respuesta antiparasitaria local de la placenta. El recambio epitelial implica la regulación de procesos celulares que incluyen a la proliferación, diferenciación y apoptosis y que, además, son regulados por el parásito. Por otro lado, la infección ex vivo de explantes placentarios humanos (HPE) con T. cruzi induce un perfil de miRNAs específico que incluye miRNAs placenta-específicos del cluster C19MC como es el miR-515-5p. Interesantemente, este miRNA está relacionado con la regulación de la diferenciación del trofoblasto. MiR-515-5p regula la diferenciación del trofoblasto al inhibir al factor de transcripción hGCM1(human glial cell missing-1 factor), que a su vez regula la expresión de otros genes fundamentales para la diferenciación. Así, durante la diferenciación del trofoblasto la expresión de miR-515-5p es inhibida. En la presente Memoria de Título se demostró que: i) T. cruzi disminuye la expresión de miR-515-5p durante la infección ex vivo de explantes de placenta humana (HPE); ii) los HPE pueden ser efectivamente transfectados con mimics y antagomirs de miR-515-5p; iii) la transfección no causa daño tisular en los HPE y iv) miR-515-5p modula la susceptibilidad a la infección con T. cruzi. Se concluye que la susceptibilidad a la infección en la placenta humana está mediada, al menos parcialmente, por miR-515-5p.

Trypanosoma cruzi, a zoonotic protozoan parasite, is the causative agent of Chagas disease. Congenital transmission is a significant Public Health problem despite its low transmission rates. Previously, it has been demonstrated that the epithelial turnover is part of local placental antiparasitic mechanisms. The epithelial turnover implies regulation of cellular processes that include proliferation, differentiation, and apoptosis. On the other hand, ex vivo infection of human placental explants with T. cruzi induces a specific miRNA profile that includes the placenta-specific miR-515-5p codified in the C19MC cluster. Interestingly, this miRNA is related to trophoblast differentiation through inhibition of the transcription factor hGCM1(human glial cell missing-1 factor), which in turn induces the expression of other fundamental genes for trophoblast differentiation. Thus, during trophoblast differentiation, miR-515-5p expression is inhibited. This Undergraduate Thesis evaluated the possible role of miR-515-5p during ex vivo infection of human placental explants (HPE). Results indicated that: i) T. cruzi decrease miR-515-5p expression during ex vivo infection of HPE; ii) HPE can be effectively transfected with miR-515-5p mimics and antagomirs; iii) transfection does not cause tissue damage of HPE, and iv) miR-515-5p modulate susceptibility to T. cruzi infection. It was concluded, that the susceptibility to ex vivo infection of human placental explants is at least partially mediated by the placenta-specific miR-515-5p.