Saneamiento de la vid cv. red globe del virus asociado a la lesión del patrón de uva de mesa (grslav) mediante termoterapia y cultivo de tejidos.

Abstract

Se realizó un estudio preliminar para determinar el efecto combinado de la termoterapia y el cultivo de tejidos in vitro sobre vid variedad “Red Globe” infectada con el Grapevine Rootstock Stem Lession associated Virus (GRSLaV). Cinco plantas de “Red Globe” provenientes de una planta madre positiva a GRSLaV, verificado a través de RT-PCR se sometieron a 0; 20; 40; 60; 80 y 100 días a 38 ºC y 75% de humedad relativa. En cada período se extrajeron brotes provenientes de los crecimientos nuevos. De los brotes nuevos se usaron las yemas apicales y se establecieron in vitro. Posteriormente se transfirieron a un medio de enraizamiento, y se aclimataron en invernadero. Se obtuvieron 10 plantas aclimatadas por cada período y cuando se lignificó el tallo, se sometieron a una prueba de DAS-ELISA y aquellas que resultaron negativas fueron sometidas posteriormente a una prueba de RT-PCR. El mayor crecimiento de brotes nuevos de las plantas dentro de la cámara de termoterapia se obtuvo a los 60 días, creciendo fuertemente desde los 20 días. Después de este máximo crecimiento, las plantas comenzaron a decaer hacia los tratamientos térmicos 80 y 100 días. A los 20 días de tratamiento se obtuvo un 10% de plantas libres de GRSLaV y a los 40 días, 60%. Todos los demás períodos no produjeron plantas sanas. Este resultado deja de manifiesto que no sólo la exposición a las altas temperaturas son efectivas para la obtención de plantas libres de GRSLaV, sino que también lo es la velocidad de crecimiento de los nuevos brotes. Se demuestra que la combinación de termoterapia con cultivo de tejidos es una herramienta capaz de generar plantas libres de este nuevo patógeno que afecta las vides en Chile.

A preliminary study was conducted to determinate the combined effect of thermotherapy and the culture of in vitro tissues upon the Red Globe grape variety infected with the Grapevine Rootstock Stem Lession associated Virus (GRSLaV). Five Red Globe plants, coming from a positive mother plant to GRSLaV verified by means of RT-PCR were submitted to 0; 20; 40; 60; 80 and 100 days at 38ºC and 75% of humidity. In each period shoots were extracted coming from the new growths. The apical buds of the new shoots were used and established in vitro. They were later transferred to a rooting medium and acclimated in a greenhouse. Ten acclimated plants were obtained for each period and when the stem was lignified, they were submitted to a DAS-ELISA test. The ones that proved to be negative were later submitted to a RT-PCR test. The best growth of new shoots inside the thermotherapy chamber was obtained after 60 days; the growth was easily noticeable from day 20 on. After this maximun growth, plants began to fade towards 80 and 100 days heat treatment. After 20 days of thermotherapy a 10% of plants free from GRSLaV was obtained and 60% after 40 day. All the other periods did not produce healthy plants. This result shows that not only the exposure to high temperatures is effective to obtain plants free from GRSLaV, but also is speed of growth of the new shoots. Thus it becomes evident that the combination of thermotherapy with tissue culture is an effective tool which is able to generate plants that are free from this new pathogen that affects grapes in Chile.