Caracterización molecular y serológica de agentes causales de vibriosis en salmónidos en el sur de Chile

Abstract

La aparición de vibriosis en los cultivos de peces en Chile ha causado masivas mortalidades de salmónidos cultivados en el sur de nuestro país. Debido a la gran trascendencia económica de esta patología se han estudiado 77 aislados, los cuales han sido identificados a nivel de especie y caracterizados genética, molecular y antigénicamente con el fin de desarrollar futuras medidas de prevención.

El análisis de la secuencia del gen rRNA 16S de todos los aislados, permitió identificarlos dentro de las especies Listonella anguillarum (antes Vibrio anguillarum) y Vibrio ordalii. Trece aislados se relacionaron genéticamente a la especie L. anguillarum y un grupo mayoritario de 61 aislados presentó homología con la secuencia tipo de V. ordalii.

Desde el punto de vista genético, molecular y antigénico, las cepas chilenas de V. ordalii constituyen un grupo homogéneo. Por el contrario, las cepas de L. anguillarum son heterogéneas en cada una de las propiedades señaladas anteriormente.

De esta forma, mediante la técnica de electroforésis de campo pulsado (PFGE) fue posible observar al menos 3 grupos genéticos dentro de las cepas chilenas de L. anguillarum. Sin embargo, al emplear métodos basados en la Reacción en Cadena de la Polimerasa de elementos repetitivos (PCR-ERIC y PCRREP) fue posible obtener mayores diferencias, las que podrían ser empleadas para el seguimiento de un aislado en particular con fines de llevar a cabo estudios epidemiológicos.

Además, se determinó la existencia de dos grupos serológicos mayoritarios dentro de los aislados chilenos de L. anguillarun, los cuales no pertenecen a los serotipos O1 y O2 que comunmente están asociados a la vibriosis clásica que afecta a especies salmónideas.

Los estudios de virulencia demostraron que las cepas de L. anguillarum y V. ordalii son capaces de causar mortalidad en peces de la especie salmón del Atlántico (Salmo salar), reproduciendo fielmente los signos característicos de ambas patologías.

Esta tesis constituye el primer reporte de L. anguillarum como agente causal de vibriosis en salmónidos en Chile

The outbreaks of vibriosis in Chilean fish farms have caused massive mortalities of reared salmonids in our country. Due to the great economical importance of this pathology we have studied 77 isolates, which have been identified to the level of species and also have been characterized genetically, molecularly and antigenically with the purpose of developing future control measures. The analysis of the 16S rRNA gene of the total number of isolates, allowed us to identify them as belonging to the species Listonella anguillarum (formerly Vibrio anguillarum) and Vibrio ordalii. In this way, 13 isolates were genetically classified as L. anguillarum while a major group of 61 isolates showed homology with V. ordalii. The Chilean strains of V. ordalii constitute a homogeneous group according to genetic, antigenic and molecular criteria. On the contrary, the isolates of L. anguillarum are heterogeneous in each of the properties indicated above. When we analysed the Chilean isolates of L. anguillarum with the technique of pulse field gel electrophoresis (PFGE), three genetic groups could be identified. Furthermore, more differences were observed when PCR-based techniques such as PCR-ERIC and PCR-REP were used. These could be used for the follow-up of isolates in epidemiological studies. Also, we have described the existence of two major serological groups among Chilean isolates of L. anguillarum, which are not related to any of those commonly found that causing infection in salmonid fish elsewhere (serotypes O1 and O2). On the other hand, virulence studies have shown that isolates of L. anguillarum and V. ordalii are capable of causing mortality in fish of Atlantic salmon (Salmo salar). The characteristic signs of both pathogens were observed. This thesis constitutes the first report of L. anguillarum as being responsible of vibriosis of salmonids in Chile.