Mejoramiento del proceso de propagación in vitro de plantas de arándano para las variedades bluecrop, duke y misty

Abstract

La presente investigación se realizó con el objetivo de mejorar y adaptar el protocolo de micropropagación normalmente utilizado para arándano, Woody Plant Medium (Lloyd y McCown, 1980) (Anexo 1), utilizado en el Laboratorio de Genética Vegetal de la Universidad de Chile para las variedades highbush: Bluecrop, Duke y Misty. Se realizaron ensayos con el fin de cubrir todo el proceso de micropropagación, desde la etapa de establecimiento hasta la aclimatación. En la etapa de establecimiento se realizó un ensayo de luz y oscuridad, con el fin de disminuir los explantes necrosados, causados por la presencia de compuestos fenólicos al someter los explantes a altas intensidades lumínicas. Se determinó estadísticamente que no existían diferencias significativas entre los tratamientos, para los parámetros número, crecimiento, tasas de establecimiento y tasa de proliferación de brotes, en las tres variedades, sin embargo se observó una tendencia positiva en respuesta a la oscuridad en las variedades Misty y Duke en los parámetros evaluados, mientras que la variedad Bluecrop se comportó en forma indiferente a la oscuridad. En la etapa de multiplicación se realizó un ensayo donde se probaron 4 niveles de pH en los medios de cultivo (pH: 5,0 – 5,3 – 5,7 – 6,0) con el objetivo de determinar el nivel al cual se produjo mayor crecimiento de brotes. Estadísticamente no se encontraron diferencias significativas entre los tratamientos para los parámetros evaluados y variedades, sin embargo también se presentó una tendencia positiva al crecimiento de brotes y tasa de proliferación a pH 5,0-5,3. A pH más altos se mantuvo el crecimiento de los brotes, pero este fue menor, y en algunos casos se produjo necrosamiento de explantes, comportamiento que se repitió en las tres variedades. Se realizó un ensayo de pre-aclimatación in vitro solo en la variedad Bluecrop para determinar el efecto de enraizamiento y aclimatación de los brotes. Los tratamientos de preaclimatación in vitro consistieron en someter los brotes durante 30 o 60 días en un medio de cultivo sin regulador de crecimiento, y una repetición de cada uno de ellos agregando 20 cc de agua destilada estéril sobre el medio sólido, 10 días antes de completar los 30 o 60 días. Se encontraron diferencias significativas en el número de brotes enraizados, a los 10 días de evaluación, presentando mayor número de brotes enraizados en aquellos sometidos a 30 días en un medio sin regulador de crecimiento. Por otra parte los brotes sometidos durante 60 días en este medio sin regulador de crecimiento y su repetición con agua, presentaron mayor longitud, vigor, tamaño y número de hojas. La adición de agua destilada no tuvo un efecto mayor en la aclimatación de los brotes.

This research was conducted to improve and adapt the protocol normally used for micropropagation of blueberry Woody Plant Medium (Lloyd and McCown, 1980) (Annex 1) used in the Laboratory of Plant Genetics, University of Chile, for varieties highbush, Bluecrop, Duke and Misty. Trials were conducted in order to cover all the micropropagation process, from setting up the stage of acclimation. At the stage of establishing a trial of light and darkness, in order to reduce the explants necrotic, caused by the presence of phenolic compounds, subjecting explants to high light intensity. It was determined that there were no statistically significant differences among the treatments for the parameters number, growth rates of establishment and rate of proliferation of shoots in the three varieties, however a positive trend was observed in response to the dark varieties Misty Duke and evaluated on the parameters, while the variety Bluecrop behaved in any way in the dark. During the multiplication was performed a test where 4 different pH levels were tested: 5,0- 5,3- 5,7- 6,0 in the culture media to determine the level at which there was greater growth of shoots. No statistically significant differences were found between treatments for the evaluated parameters and varieties; however it was observed a positive trend in the growth rate of shoots and proliferation at pH 5.0-5.3. Higher pH maintained shoot growth, but this was minor, and in some cases there were necrotic explants, this behaviour were observed in the three varieties. It was performed a trial of pre-acclimated in vitro only in the variety Bluecrop to determine their effect on rooting and acclimatization of shoots. The pre-treatment consisted of in vitro acclimatization submit outbreaks for 30 or 60 days in culture medium without growth regulators, and a repeat each adding 20 cc of sterile distilled water on the solid medium, 10 days before completing the 30 and 60 days. We found significant differences in the number of rooted shoots, the 10 days of evaluation, a greater number of shoots rooted in those subjected to 30 days in a medium without growth regulators. On the other hand shoots subjected during 60 days in this medium without growth regulator and re-using water, showed a greater length, force, size and number of leaves. The addition of distilled water did not have a greater effect on acclimation of shoots.