Caracterización de subpoblaciones linfocitarias y de células NK en adultos con neumonía adquirida en la comunidad mediante citometría de flujo

Abstract

La Neumonía Adquirida en la Comunidad (NAC) es una infección aguda del parénquima pulmonar de origen extrahospitalario, causada por virus y bacterias. La gravedad de la NAC sería independiente de la etiología y dependiente de la respuesta inmune del hospedero. Con el objetivo de caracterizar la respuesta inmune celular en adultos con NAC viral y/o por S.pneumoniae de acuerdo a la gravedad se compararon subpoblaciones de linfocitos y células NK, determinadas por hemograma y citometría de flujo en muestras de sangre periférica de 68 adultos con NAC y de 22 adultos asintomáticos. En 58 pacientes con NAC, se identificó S.pneumoniae mediante detección de antígeno urinario y virus respiratorios por reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real y por ensayo de inmunofluorescencia. El agente infeccioso con mayor detección fue Rinovirus (35.2%). Se analizaron variables demográficas y clínicas de los pacientes, clasificándose de acuerdo al Índice de Severidad de la Neumonía en casos leves (n=28) y graves (n= 40). Los análisis estadísticos se realizaron con el programa SigmaPlot, con p<0.05 significativo. Los adultos con NAC tuvieron menores porcentajes de monocitos (5.2% versus 8.8%), linfocitos totales (12.2% versus 26.4%), linfocitos T CD3+/CD8+ (2.5% versus 6.3%), linfocitos T CD3+/CD4+ (3.8% versus 8.9%); linfocitos T FoxP3+ (0.1% versus 0.3%), células NK activadas (CD56+/NKG2D+: 1.6% versus 4.1%) e inactivadas (CD94+/NKG2A+: 0.7% versus 2.5; CD56+/CD158b+: 0.7% versus 1.2%; CD56+/CD161+: 1.0% versus 3.5%) y mayores porcentajes de granulocitos (82.4% versus 64.9%) que los adultos asintomáticos. Los adultos con NAC grave tuvieron menores porcentajes de linfocitos y monocitos (10.5% versus 18.2% y 4.3% versus 6.6%, respectivamente), linfocitos T citotóxicos CD3+/CD8+ (2.1% versus 3.8%), linfocitos T ayudadores CD3+/CD4+ (2.6% versus 5.2%), células NK activadas (CD56+/NKG2D+: 1.5% versus 2.3%) y células NK inactivadas (CD94+/NKG2A+: 0.5% versus 1.3%; CD56+/CD158b+: 0.4% versus 0.9%) y mayores porcentajes de granulocitos (85.1% versus 74.7%) que los pacientes con NAC leve. Todos los parámetros inmunológicos fueron similares entre pacientes con NAC y agente infeccioso detectado respecto a los casos sin agente. En conclusión, la respuesta inmune celular, en cuanto a las proporciones de linfocitos y células NK estaría disminuida en los pacientes con NAC independiente de su etiología, en especial en los pacientes con NAC grave

Community-Acquired Pneumonia (CAP) is an acute infection of the lung parenchyma acquired outside the hospital, caused by viruses and bacteria. Severity of CAP would be independent of the etiology and dependent on the host immune response. For characterizing cellular immune response in adults with viral and/or S.pneumoniae CAP according to severity, subpopulations of lymphocytes and NK cells were compared and determined by blood count and flow cytometry in peripheral blood from 68 adults with CAP and 22 asymptomatic adults. In 58 patients with CAP, S.pneumoniae and/or respiratory viruses were detected by detection of urinary antigen, real-time polymerase chain reaction and immunofluorescence assays, respectively. Rhinovirus was the most frequently detected (35.2%). Demographic and clinical characteristics were analyzed, and patients were classified according to the Pneumonia Severity Index in mild (n=28) and severe cases (n=40). Statistical analyses were performed using SigmaPlot software and p<0.05 was considered significant. Adults with CAP had lower percentages of monocytes (5.2% versus 8.8%), total lymphocytes (12.2% versus 26.4%), T cytotoxic lymphocytes CD3+/CD8+ (2.5% versus 6.3%), T helper lymphocytes CD3+/CD4+ (3.8% versus 8.9%); T regulatory lymphocytes FoxP3+ (0.1% versus 0.3%), activated NK cells (CD56+/NKG2D+: 1.6% versus 4.1%) and inactivated NK cells (CD94+/NKG2A+: 0.7% versus 2.5; CD56+/CD158b+: 0.7% versus 1.2%; CD56+/CD161+: 1.0% versus 3.5%) and higher percentages of granulocytes (82.4% versus 64.9%) than asymptomatic adults. Adults with severe CAP had lower percentages of lymphocytes and monocytes (10.5% versus 18.2% and 4.3% versus 6.6%, respectively), T cytotoxic lymphocytes CD3+/CD8+ (2.1% versus 3.8%), T helper lymphocytes CD3+/CD4+ (2.6% versus 5.2%), activated NK cells (CD56+/NKG2D+: 1.5% versus 2.3%) and inactivated NK cells (CD94+/NKG2A+: 0.5% versus 1.3%; CD56+/CD158b+: 0.4% versus 0.9%) and higher percentages of granulocytes (85.1% vs. 74.7%) than patients with mild CAP. All immunological parameters were similar between CAP patients with detected infectious agent and cases with no identified pathogen. In conclusion, the cellular immune response, in terms of the proportions of lymphocytes and cells NK would be decreased in patients with CAP independent of their etiology, especially in patients with severe CAP